Question

【題目】（題文）農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了廣泛的運用。下面是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的示意圖，試回答下列問題：

（1）獲取目的基因的方法一般有_____、______等（寫出兩種）。理論上，基因組文庫含有一種生物的____基因；而cDNA文庫中含有生物的_____基因。

（2）圖中c過程中，農(nóng)桿菌能感染_______、______植物，原理是：在農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在______片段，它具有可以整合到受體細胞______的特點，從而通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使目的基因進入植物細胞并穩(wěn)定維持和表達。

（3）植物基因工程中將目的基因?qū)�入受體細胞的方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外，還可采取的方法是________、_______。(至少寫出兩種)

Answer 1

【答案】 從基因文庫中獲取目的基因 利用PCR技術擴增目的基因或通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成等 全部 部分 雙子葉植物 裸子植物 T—DNA片段 染色體DNA 基因槍法 花粉管通道法

【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。據(jù)圖分析，a表示構建基因表達載體的過程，b表示將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌的過程，c表示將含有重組質(zhì)粒（目的基因）的農(nóng)桿菌導入植物細胞的過程，d表示植物組織培養(yǎng)的過程。

（1）基因工程的第一個步驟是獲取目的基因，常用的方法有從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR技術擴增目的基因、通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成等；基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫，其中基因組文庫含有該種生物的全部基因，而cDNA文庫只含有該種生物的部分基因。

（2）在自然條件下，農(nóng)桿菌可以感染雙子葉植物和裸子植物，而對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體原理是在農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在T-DNA片段，它具有可轉(zhuǎn)移至受體細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上的特點，因此只要將攜帶外源基因的DNA片段插入到T-DNA片段即可實現(xiàn)將目的基因?qū)�入到植物細胞染色體的DNA。

（3）將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。