【題目】科研人員為了分離、篩選藍莓果酒專用酵母來改善藍莓果酒的品質,進行了如下實驗:

① 取不同品種成熟藍莓制果漿,置于恒溫培養(yǎng)箱中自然發(fā)酵至產生大量氣泡和明顯酒味;

② 將藍莓發(fā)酵液梯度稀釋后,進行涂布平板操作,每個濃度梯度3個平板,并在恒溫下培養(yǎng)2d,根據(jù)酵母菌菌落特征挑取單菌落;

③ 將挑取的單菌落擴大培養(yǎng)后,通過平板劃線法分離純化并保存;

④ 檢測篩選菌株的發(fā)酵性能,得到如下實驗結果。

品種

乙醇體積分數(shù)/%

pH

8%

10%

12%

14%

15%

4.00

2.98

2.03

1.48

葡萄釀酒酵母

++++

++++

+

-

-

++++

++++

-

-

BL-21

++++

+++

+

-

-

++++

++++

-

-

BF-09

++++

++++

++

-

-

++++

++++

+

-

BF-17

++++

++++

++

+

-

++++

++++

++

-

注:“-”表示不產氣;“+”表示產氣,“+”越多產氣越多。

請分析回答:

(1)步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在20℃左右,其主要目的是________________________。

(2)步驟②中,發(fā)酵液應使用無菌水進行梯度稀釋。稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是____________

(3)配制培養(yǎng)某的主要步驟是:計算→稱量→溶化→ ______→倒平板。在接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是________________________。

(4)步驟③平板劃線時,常用的工具是接種環(huán),對接種環(huán)的處理要求是__________________

(5)固體培養(yǎng)基常用瓊脂作凝固劑,理想的凝固劑應具有的特點是____________(多選)。

A.含有某些特殊的營養(yǎng)物質 B.消毒滅菌不會改變其特性

C.能被微生物分解和利用 D.微生物生長溫度范圍內保持固體狀態(tài)

E.配制方便且有良好的透明性

(6)根據(jù)實驗結果推知,____________(品種)是較理想的釀酒菌種。

【答案】使酵母菌細胞快速生長、繁殖 在稀釋度足夠高的菌液里,將聚集在一起的微生物分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 滅菌 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進行灼燒滅菌 BDE BF-17

【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型.果酒制作的原理:(1)在有氧條件下,反應式如下;(2)在無氧條件下,反應式如下。2、稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面進行培養(yǎng);在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落.

(1)酵母菌生長的適宜溫度是18-25℃,所以步驟①恒溫培養(yǎng)箱的溫度控制在22℃左右的目的是為酵母菌細胞生長、繁殖提供適宜的溫度.

(2)步驟②中,發(fā)酵液應使用無菌水進行梯度稀釋.稀釋涂布平板法依據(jù)的原理是在稀釋度足夠高的菌液里,將聚集在一起的菌種分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落.

(3)配制培養(yǎng)某的主要步驟是:計算稱量溶化滅菌倒平板。在接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格

(4)步驟③平板劃線時,常用的工具是接種環(huán),對接種環(huán)的處理要求是每次劃線前后都要用灼燒法對接種環(huán)進行灼燒滅菌.

(5)固體培養(yǎng)基常用瓊脂作凝固劑,理想的凝固劑應具有的特點是消毒滅菌不會改變其特性、微生物生長溫度范圍內保持固體狀態(tài)、配制方便且有良好的透明性.故選:BDE.

(6)分析表格中的發(fā)酵性能可知,BF-17對乙醇和酸的耐受性最強,是較理想的釀酒菌種.

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