Question

【題目】在培育轉基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。請據圖回答：

（1）A過程需要的酶有：_______________________________________。

（2）將目的基因導入植物體細胞除了上述農桿菌轉化法之外，還可用________ ____ 法（任填一種）；可用__________ __ _技術檢測轉基抗蟲棉是否成功表達出Bt毒蛋白；除抗蟲基因外，基因表達載體中還必須包含的部分是__________________________ （至少寫出兩點）。

（3）B選擇培養(yǎng)過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質、瓊脂和激素外，還必須加入_____________。

（4）由外植體培養(yǎng)為轉基因植株的D、E過程分別為_______________，該過程的理論基礎是_______________ ___。

Answer 1

【答案】（1）限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶。

（2）基因槍法（花粉管通道法） ； 抗原—抗體雜交；

啟動子、終止子、標記基因。

（3）卡那霉素 （4）脫分化、再分化； 細胞的全能性

【解析】（1）圖中A過程表示基因表達載體的構建，該過程需要的酶有限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶。

（2）將目的基因導入植物體細胞常用的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；可用抗原—抗體雜交法檢測目的基因是否成功表達出相應蛋白質；本題中的抗蟲基因為目的基因，基因表達載體中除了目的基因外，還必須包含啟動子、終止子、標記基因等。

（3）根據題意可知，重組質粒上的標記基因是卡那霉素抗性基因（kan）。由于只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長，所以可用含卡那霉素的培養(yǎng)基對土壤農桿菌進行培養(yǎng)，從而篩選出含重組質粒的土壤農桿菌。

（4）由外植體培養(yǎng)為轉基因植株是通過植物組織培養(yǎng)技術完成的，所以圖中的D、E過程分別為脫分化和再分化；該過程的理論基礎是細胞的全能性。