Question

【題目】根據(jù)基因工程的有關(guān)知識,回答下列問題:

（1）限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有________和________。

（2）質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:

為使運(yùn)載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性核酸內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是________。

（3）按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即________DNA連接酶和________DNA連接酶。

（4）反轉(zhuǎn)錄作用的模板是________,產(chǎn)物是________。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用________技術(shù)。

（5）基因工程中除質(zhì)粒外,________和________也可作為運(yùn)載體。

Answer 1

【答案】黏性末端平末端切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同大腸桿菌T4mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR噬菌體動植物病毒

【解析】

基因工程的三種工具：限制酶、DNA連接酶和載體。限制酶存在于原核生物中，識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，形成的末端有黏性末端和平末端兩種。DNA連接酶能將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵，可分為E.coli DNA連接酶和T4 DNA連接酶兩大類，E.coli DNA連接酶只“縫合”黏性末端，T4 DNA連接酶黏性末端和平末端都可以“縫合”。載體能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)；具有標(biāo)記基因，最常用的載體是質(zhì)粒，另外，動植物病毒和λ噬菌體的衍生物也可作為運(yùn)載體。載體可以攜帶外源DNA片段進(jìn)入受體細(xì)胞。可在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制或整合到染色體DNA上隨染色體DNA進(jìn)行同步復(fù)制。

（1）限制性核酸內(nèi)切酶可以將DNA分子切成兩種類型的末端，平末端和黏性末端．
（2）兩種不同酶切割之后便于相連，所產(chǎn)生的黏性末端必須相同．因此為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同。

（3）DNA連接酶可分為兩類：一類是T4 DNA連接酶，另一類是 E.coli DNA連接酶。
（4）反轉(zhuǎn)錄是以mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA，利用PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。
（5）基因工程中除質(zhì)粒外，動植物病毒和λ噬菌體的衍生物也可作為運(yùn)載體。