Question

【題目】土壤中大部分磷與 Ca2+、Al3+結(jié)合形成難溶性磷酸鹽，導(dǎo)致植物不能直接吸收利用。科研人員從土壤中分離出能將難溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為可溶性磷酸鹽的曲霉，并比較其對(duì)不同難溶性磷酸鹽的溶磷效果，請(qǐng)回答相關(guān)問題：

（1）配制培養(yǎng)基：稱取葡萄糖10g、MgSO4·7H2O 0.3g、羥基磷灰石5g、(NH4)2SO4 0.5g、NaCl 0.2g、KCl 0.2g、MnSO4 0.03g、FeSO4·7H2O 0.01g、瓊脂20g，用水溶解后定容至1L，調(diào)節(jié)pH至_____性，滅菌并冷卻，加入無菌的鏈霉素和氯霉素溶液，混勻后倒平板。鏈霉素和氯霉素屬于抗生素，其作用是______________________________。

（2）制作土壤懸液：稱取適量土壤，溶于____________，并進(jìn)行梯度稀釋；該過程應(yīng)在___________附近進(jìn)行。

（3）目的菌的分離與鑒定：將少量稀釋液滴于培養(yǎng)基，用___________將樣液均勻涂布在培養(yǎng)基的表面，培養(yǎng)后得到單菌落，鑒定出多種溶磷曲霉比如黑曲霉。若要保存鑒定的菌種，可在菌液中加入無菌且適量的______，混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。

（4）黑曲霉對(duì)不同難溶性磷酸鹽溶磷效果的比較：將黑曲霉接種到平板A（含磷酸鈣）和平板B（含磷酸鋅）上，25℃培養(yǎng)一段時(shí)間后，測(cè)定溶磷圈的直徑分別為5.8cm和3.8cm，對(duì)應(yīng)的菌落直徑分別為3.3 cm和1.2 cm（見圖）。由此可得出黑曲霉對(duì)____（填“磷酸鈣”或“磷酸鋅”）的溶磷效果較好，理由是___________________________________________。

Answer 1

【答案】 酸 抑制或殺死細(xì)菌等雜菌 無菌水 酒精燈的火焰 涂布器 甘油 磷酸鋅 溶磷圈直徑與菌落直徑的比值反應(yīng)溶磷能力，而含磷酸鋅的平板對(duì)應(yīng)的此比值較大

【解析】由題文描述可知：該題綜合考查學(xué)生對(duì)微生物培養(yǎng)基成分、作用和制作流程以及菌種的分離和保存等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。

(1) 霉菌為真核生物，培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性。鏈霉素和氯霉素都是作用于原核生物的核糖體，從而阻礙蛋白質(zhì)合成達(dá)到抗菌的作用，可見，在配制培養(yǎng)基時(shí)，加入鏈霉素和氯霉素的作用是抑制或殺死細(xì)菌等雜菌。

(2)為了防止雜菌污染，在制作土壤懸液時(shí)，溶解土壤要用無菌水；進(jìn)行梯度稀釋時(shí)應(yīng)在酒精燈的火焰附近進(jìn)行。

(3) 純化微生物時(shí)常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。運(yùn)用稀釋涂布平板法接種微生物時(shí)，所用的工具是涂布器。在-20℃保存菌種的方法為甘油管藏法，需要在菌液中加入適量甘油。

(4)依題意可知：溶磷圈直徑與菌落直徑的比值，平板A（含磷酸鈣）上的為5.8÷3.3≈1.8，平板B（含磷酸鋅）上的為3.8÷1.2≈3.2。因溶磷圈直徑與菌落直徑的比值反應(yīng)溶磷能力的大小，而含磷酸鋅的平板對(duì)應(yīng)的此比值較大，所以黑曲霉對(duì)磷酸鋅的溶磷效果較好。