Question

9．(14分)噬菌體有極強(qiáng)的侵染能力，能在細(xì)菌中快速進(jìn)行DNA復(fù)制，產(chǎn)生子代噬菌體，最終導(dǎo)致細(xì)菌破裂(稱為溶菌狀態(tài))；或者整合到細(xì)菌基因組中潛伏起來，不產(chǎn)生子代噬菌體(稱為溶原狀態(tài))。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中常用噬菌體構(gòu)建基因克隆載體，使其在受體細(xì)菌中大量擴(kuò)增外源DNA，以備研究使用。相關(guān)操作如下圖所示，請(qǐng)回答。

    (1)組裝噬菌體時(shí)，可被噬菌體蛋白質(zhì)包裝的DNA長(zhǎng)度約為36～51 kb，則經(jīng)人工改造的gtl0載體可插入的外源DNA的最大長(zhǎng)度為        kb。人工改造載體時(shí)，為獲得較大的插入能力，可刪除噬菌體DNA組成中的         序列以縮短其長(zhǎng)度。

(2)噬菌體DNA上通常沒有適合的標(biāo)記基因，因此人工改造時(shí)需加裝適合的標(biāo)記基因，如上圖gtl0載體中的imm434基因。該基因編碼一種阻止噬菌體進(jìn)入溶菌狀態(tài)的阻遏物。構(gòu)建基囚克隆載體需用到的酶是        ，外源DNA的插入位置應(yīng)位于imm434基因           (之中／之外)，使經(jīng)侵染培養(yǎng)后的受體菌處于          狀態(tài)。

    (3)蛋白質(zhì)與DNA相比，特有的化學(xué)元素是        ，若用放射性同位素標(biāo)記該元素，再用被標(biāo)記的噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌，短時(shí)保溫后攪拌、離心，可檢測(cè)到放射性物質(zhì)主要分布在試管            部分。

Answer 1

【答案】(1)7.6     控制溶原生長(zhǎng)(或中部)     (2)限制酶和DNA連接酶    之中    溶菌    (3)S    上清液

【解析】考查基因工程的相關(guān)知識(shí)、蛋白質(zhì)與DNA的比較等知識(shí)、同位素標(biāo)記法。

(1)根據(jù)題意分析組裝噬菌體時(shí)，可插入的外源DNA的最大長(zhǎng)度為51-43.4=7.6kb。為獲得較大的插入能力，人工改造載體時(shí)，可刪除噬菌體DNA組成中的中部序列以縮短其長(zhǎng)度。

(2)構(gòu)建基因克隆載體需用到的酶是限制酶和DNA連接酶，外源DNA的插入位置應(yīng)位于im434基因之中，使經(jīng)侵染培養(yǎng)后的受體菌處于溶菌狀態(tài)。

(3)蛋白質(zhì)與DNA相比，特有的化學(xué)元素是S，若用放射性同位素標(biāo)記該元素，再用被標(biāo)記的噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌，短時(shí)保溫后攪拌、離心，可檢測(cè)到放射性物質(zhì)主要分布在試管上清液中。