Question

【題目】PCR是一種快速擴(kuò)增DNA的方法，用于放大特定的DNA片段，數(shù)小時(shí)內(nèi)可使目的基因片段擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)份。PCR技術(shù)需要模板DNA、引物、四種脫氧核苷酸和DNA聚合酶等條件。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）PCR的全稱(chēng)是_______，是一種_____迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。該過(guò)程所需的酶具有______的特點(diǎn)。

（2）PCR的反應(yīng)過(guò)程主要包括_____、_______、_____三個(gè)階段，先用95℃高溫處理的目的是______，而這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)_______________________的催化實(shí)現(xiàn)的。

（3）DNA子鏈復(fù)制的方向是_____，這是由于DNA聚合酶只能從引物的______端開(kāi)始連接單個(gè)脫氧核苷酸分子。

（4）在PCR技術(shù)中所需要的引物實(shí)質(zhì)上是一種單鏈DNA或RNA分子。請(qǐng)?jiān)趫D中繪出引物結(jié)合的位置。

_______

Answer 1

【答案】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 熱穩(wěn)定性高（耐高溫） 變性 復(fù)性 延伸 使DNA解旋為單鏈 DNA解旋酶 從5’端到3’端 3’端

【解析】

PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸，以便根據(jù)這一序列合成引物。向PCR反應(yīng)體系中除了要加入兩種引物外還要加入DNA模板、耐熱的DNA聚合酶、四種脫氧核糖核酸。PCR反應(yīng)每輪循環(huán)需經(jīng)過(guò)變性、復(fù)性、延伸三步。

（1）PCR的全稱(chēng)是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。在PCR技術(shù)中需用95℃高溫處理使DNA解旋，而高溫會(huì)使一般的DNA聚合酶變性失活，所以該過(guò)程所需的酶具有熱穩(wěn)定性高的特點(diǎn)。
（2）PCR的反應(yīng)過(guò)程主要包括變性、復(fù)性、延伸三個(gè)階段，在PCR技術(shù)中先用95℃高溫下處理的目的是使DNA變性，使DNA解旋為單鏈，而這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)解旋酶的催化實(shí)現(xiàn)的。

（3）引物通常是一種單鏈DNA，它能與解開(kāi)的DNA母鏈的3端結(jié)合，為DNA聚合酶提供吸附位點(diǎn)，使DNA聚合酶從引物的3端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，從而決定了DNA子鏈復(fù)制的方向是從5端到3端。

（4）引物可與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)，由于DNA的兩條鏈為反向螺旋，所以引物結(jié)合的位置：。