A. | 經(jīng)蒸餾水處理的紅細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時(shí)間過(guò)短 | |
B. | 溶解時(shí)所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達(dá)到2mol/L | |
C. | DNA再溶解時(shí),玻璃棒攪拌方向是單向的 | |
D. | 向2mol/LNaCl溶液中加入蒸餾水太少 |
分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理:
(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性.
(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色.
2、DNA粗提取和鑒定的過(guò)程:
(1)實(shí)驗(yàn)材料的選�。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織,成功的可能性更大.
(2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液:
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過(guò)濾后收集濾液即可.如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜.例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過(guò)濾后收集研磨液.
(3)去除濾液中的雜質(zhì):
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同.
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離.
(4)DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過(guò)濾,加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA.用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分.
②取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解.然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑.混合均勻后,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán).
解答 解:A、經(jīng)蒸餾水處理的紅細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時(shí)間過(guò)短,部分細(xì)胞還未破裂,這會(huì)造成DNA的提取量不足,A正確;
B、NaCl溶液濃度在0.14~2mol/L時(shí),隨著NaCl溶液濃度的升高,DNA的溶解度越大,因此溶解時(shí)所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達(dá)到2mol/L時(shí),部分DNA還沒(méi)有溶解,這會(huì)造成DNA的提取量不足,B正確;
C、DNA再溶解時(shí),玻璃棒應(yīng)該沿著一個(gè)方向緩慢攪拌,這不會(huì)造成DNA提取量不足,C錯(cuò)誤;
D、向2mol/LNaCl溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋溶液,使DNA析出,若加入蒸餾水的量太少,稀釋度不夠,這會(huì)造成DNA的提取量不足,D正確.
故選:C.
點(diǎn)評(píng) 本題考查DNA的粗提取和鑒定,對(duì)于此類試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等,需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累.
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:解答題
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題
A. | 培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可用于檢測(cè)有毒物質(zhì) | |
B. | 體細(xì)胞核移植技術(shù)能用于治療人類某些疾病 | |
C. | 克隆動(dòng)物的產(chǎn)生主要通過(guò)核移植實(shí)現(xiàn) | |
D. | 克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞核 |
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題
A. | 染色體移向細(xì)胞兩極 | B. | 同源染色體聯(lián)會(huì) | ||
C. | 染色體排列在赤道板上 | D. | 著絲點(diǎn)一分為二 |
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:多選題
A. | 后期發(fā)酵中腐乳風(fēng)味形成與蛋白質(zhì)的降解密切相關(guān) | |
B. | 毛霉生長(zhǎng)過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由豆腐提供 | |
C. | 鹽的用量、酒的種類和用量、溫度等均影響后期發(fā)酵 | |
D. | 前期發(fā)酵過(guò)程中毛霉的生長(zhǎng)情況對(duì)后期發(fā)酵無(wú)直接影響 |
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題
A. | 初級(jí)精母細(xì)胞 | B. | 次級(jí)精母細(xì)胞 | C. | 第一極體 | D. | 次級(jí)卵母細(xì)胞 |
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:選擇題
A. | ① | B. | ①② | C. | ①④ | D. | ③④ |
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科目:高中生物 來(lái)源:2015-2016山西沂州一中高一上期末補(bǔ)考生物試卷(解析版) 題型:選擇題
下列現(xiàn)象屬于自由擴(kuò)散的是
①水分子通過(guò)植物細(xì)胞的細(xì)胞膜②水分子通過(guò)植物細(xì)胞的細(xì)胞壁
③蔗糖分子通過(guò)細(xì)胞壁④水分子或其他溶劑分子通過(guò)液泡膜
⑤水分子或其他溶劑分子通過(guò)原生質(zhì)層
A.①②③ B.③④⑤
C.①④⑤ D.①③⑤
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