【題目】脫氧核苷酸鏈?zhǔn)怯蟹较虻,一端?/span>5’端,另一端為3’端,DNA分子兩條脫氧核苷酸鏈反向平行。DNA復(fù)制時,稱為引物的小段核苷酸鏈先與模板鏈配對結(jié)合,然后在引物的3'端進(jìn)行子鏈延伸,在引物的5’端不能進(jìn)行子鏈延伸(如圖1)。

1在圖中的數(shù)字編號①~③中,代表解旋過程的是___________,此過程中發(fā)生斷裂的鍵是___________。

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)可自動化重復(fù)進(jìn)行圖中所示的①~③步驟,每完成一次①~③步驟稱為完成一個循環(huán),每個循環(huán)各步驟的反應(yīng)條件設(shè)計為:步驟①在94℃持續(xù)30秒,步驟②在55℃持續(xù)30秒,步驟③在72℃持續(xù)1分鐘。某研究小組擬用PCR技術(shù)和引物12從圖2所示DNA分子中擴(kuò)增出編碼蛋白質(zhì)H的基因,并開展后續(xù)研究。

2下列關(guān)于PCR的敘述中,正確的是___________。

A.PCR是檢測生物遺傳多樣性最可靠的方法

B.可從人體細(xì)胞提取DNA聚合酶用于PCR反應(yīng)

C.通過PCR擴(kuò)增目的基因?qū)儆诨瘜W(xué)方法人工合成

D.若引物能與模板DNA多個位置結(jié)合,則可提高PCR擴(kuò)增效率

3通過上述PCR反應(yīng)獲得目的基因片段后,擬將其插入質(zhì)粒pZHY1中構(gòu)建重組DNA分子pZHY2。已知在pZHY1上存在EcoRⅠ、BamHⅠ、KpnⅠ、Xba4種限制酶的識別序列(如表),則應(yīng)選用的限制酶組合是__________。

EcoR

BamH

Kpn

Xba

G↓AATTC

CTTAA↑G

G↓GATCC

CCTAG↑G

GGTAC↓C

C↑CATGG

T↓CTAGA

AGATC↑T

A.BamHⅠ和EcoRB.BamHⅠ和Kpn

C.EcoRⅠ和KpnD.EcoRⅠ和Xba

4將重組DNA分子pZHY2導(dǎo)入大腸桿菌后,就可通過大規(guī)模培養(yǎng)大腸桿菌制備蛋白質(zhì)H。若要獲得純化的蛋白質(zhì)H,下列操作步驟中Ⅰ代表___________,Ⅱ代表___________。

破碎細(xì)胞過濾一Ⅰ通過冷凍干燥結(jié)晶蛋白質(zhì)

①改變pH沉淀蛋白質(zhì) ②加入硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)

③將蛋白質(zhì)進(jìn)行固定化 ④通過層析提純蛋白質(zhì)

5若要制備抗蛋白質(zhì)H的單克隆抗體,相關(guān)說法中正確的有___________。

A.可以用上述步驟所得純化的蛋白質(zhì)H作為抗原免疫動物

B.從動物的脾臟收集B淋巴細(xì)胞,并使之與雜交瘤細(xì)胞融合

C.單克隆抗體是由單個雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞群分泌的成分單一的抗體

D.PCR擴(kuò)增目的基因到制備單克隆抗體,共涉及基因工程、發(fā)酵工程、細(xì)胞工程

【答案】

1 氫鍵

2C

3B

4①②

5ACD

【解析】

PCR技術(shù):

①概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù);

②原理:DNA復(fù)制;

③條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);

④方式:以指數(shù)的方式擴(kuò)增,即約2n;

⑤過程:高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸。

1在圖中的數(shù)字編號中,代表解旋過程的是①,此過程中發(fā)生斷裂的是兩條鏈之間的氫鍵。

2A、檢測生物遺傳多樣性最可靠的方法是測定基因組全序列,檢測遺傳多樣性最簡便的方法是PCR,A錯誤;

B、PCR反應(yīng)中使用的是耐高溫的DNA聚合酶,人體內(nèi)的DNA聚合酶不耐高溫,B錯誤;

C、通過PCR擴(kuò)增目的基因?qū)儆诨瘜W(xué)方法人工合成,C正確;

D、若引物能與模板DNA多個位置結(jié)合,則不能保證準(zhǔn)確復(fù)制目的基因片段,D錯誤。

故選C。

3用限制酶切割DNA片段獲得目的基因時應(yīng)保證目的基因的完整性,根據(jù)編碼蛋白H的基因左右兩端的引物結(jié)合序列可知,左側(cè)含有限制酶BamHⅠ的識別序列,右側(cè)含有限制酶KpnⅠ的識別序列,所以獲取目的基因時應(yīng)用限制酶BamHⅠKpnⅠ切割,即B正確,ACD錯誤。

故選B。

4若要獲得純化的蛋白質(zhì)H,就需要將蛋白質(zhì)與其它物質(zhì)分離,可利用不同物質(zhì)在不同pH下的溶解度不同以及在硫酸銨溶液中的溶解度不同進(jìn)行分離純化,并提純蛋白質(zhì),所以實驗步驟為:破碎細(xì)胞過濾一改變pH沉淀蛋白質(zhì)、加入硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)通過層析提純蛋白質(zhì)通過冷凍干燥結(jié)晶蛋白質(zhì),故上述步驟中代表①改變pH沉淀蛋白質(zhì)、②加入硫酸銨沉淀蛋白質(zhì),代表④通過層析提純蛋白質(zhì)。

5A、可以用上述步驟所得純化的蛋白質(zhì)H作為抗原免疫動物,獲得相關(guān)的漿細(xì)胞,A正確;

B、應(yīng)從經(jīng)過蛋白質(zhì)H免疫的動物的脾臟收集B淋巴細(xì)胞,并使之與雜交瘤細(xì)胞融合,B錯誤;

C、單克隆抗體是由單個雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞群分泌的成分單一的抗體,C正確;

D、從PCR擴(kuò)增目的基因到制備單克隆抗體,共涉及基因工程(目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建等)、發(fā)酵工程(將重組DNA分子pZHY2導(dǎo)入大腸桿菌后,通過大規(guī)模培養(yǎng)大腸桿菌制備蛋白質(zhì)H)、細(xì)胞工程(單克隆抗體的制備),D正確。

故選ACD

本題綜合考查基因工程、發(fā)酵工程和單克隆抗體的制備,意在考查考生對所學(xué)知識的理解和應(yīng)用能力。

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B. 甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的計數(shù)

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A. 應(yīng)用該技術(shù)可提高器官移植的成功率

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實驗

A

B

C

D

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綠葉中色素的提取和分離

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A.AB.BC.CD.D

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【題目】如圖表示某生態(tài)系統(tǒng)中能量流動的大致過程[單位為103kJ/m2·a]。下列說法不正確的是(

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