Question

PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，如圖表示合成過程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答問題。

(1)A過程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過程的原理敘述，正確的是(　　)。

A．該過程用耐高溫的解旋酶破壞氫鍵

B．該過程用限制酶破壞磷酸二酯鍵

C．該過程不需要解旋酶的作用

D．該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同

(2)C過程要用到的酶是________，這種酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以加入________次，________(需要、不需要)再添加。PCR反應(yīng)除提供酶外，還需要滿足的基本條件有__________________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的兩條鏈用15N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“95 ℃～55 ℃～72 ℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有15N標(biāo)記的DNA占________。

Answer 1

【解析】　本題考查PCR的過程和條件。在熟知細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過程和PCR過程異同點(diǎn)的前提下，會(huì)運(yùn)用DNA復(fù)制的有關(guān)原理是解答本題的關(guān)鍵。(1)高溫所起的作用類似于解旋酶，使雙鏈DNA變?yōu)閱捂�，因此A過程不需要解旋酶的參與。(2)C過程為PCR技術(shù)的延伸階段，當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72  ℃左右時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下合成新的DNA鏈。TaqDNA聚合酶是耐熱的，高溫下不變性，所以一次性加入即可。(3)PCR技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過3次循環(huán)，共產(chǎn)生2³個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)DNA分子含有¹⁵N標(biāo)記。

【答案】　(1)C　(2)TaqDNA聚合酶　一　不需要　DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物、四種脫氧核苷酸，同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行

(3)25%