Question

【題目】電影《我不是藥神》引起人們對慢性粒細胞白血�。�CML）的關注，CML患者的造血干細胞中22號染色體上的bcr基因與來自9號染色體上的基因abl形成bcr/abl融合基因，該融合基因的表達產物能促進骨髓細胞內mTOR蛋白過度表達從而引起白血病�？�mTOR單克隆抗體可抑制mTOR蛋白的作用而治療CML�；卮鹣铝袉栴}：

（1）科學家用___________對小鼠進行注射，一段時間后從小鼠脾臟提取出B淋巴細胞；他們通過動物細胞培養(yǎng)技術培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細胞，培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液，原因是___________。

（2）使用___________（生物的方法）將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，置于選擇培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細胞，并經(jīng)過___________培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選后獲得的細胞具有的特點是 ___________，將這些細胞注入小鼠腹腔內培養(yǎng)，在___________中可提取得到抗mTOR單克隆抗體。

（3）抗mTOR單克隆抗體在治療CML上，具有的特點是_______________________。

Answer 1

【答案】mTOR（蛋白） 防止代謝產物積累對細胞自身造成危害 滅活的（仙臺）病毒 克隆化 能迅速大量繁殖，又能產生單一性抗體 腹水 特異性強、靈敏度高，并可大量制備

【解析】

1.動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2.動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境;②營養(yǎng)；③溫度和pH ；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

3.單克隆抗體的制備流程：人工誘導經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，最終通過培養(yǎng)雜交瘤細胞獲得單克隆抗體。

（1）根據(jù)題意分析，該題是制備抗mTOR單克隆抗體，因此應該將mTOR（蛋白）作為抗原注射到小鼠體內，一段時間后從小鼠脾臟提取出相應的B淋巴細胞；動物細胞培養(yǎng)過程中需要不斷的更新培養(yǎng)液，是為了防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。

（2）可使用滅活的仙臺病毒誘導骨髓瘤細胞和經(jīng)免疫的B淋巴細胞融合；選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細胞需要經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)過多次篩選后符合要求的雜交瘤細胞能迅速大量繁殖，又能產生單一性抗體；將篩選到的雜交瘤細胞注入小鼠腹腔內培養(yǎng)，在腹水中可提取得到抗mTOR單克隆抗體。

（3）抗mTOR單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高，并可大量制備的優(yōu)點。