Question

【題目】以下是有關現(xiàn)代生物科技的兩個問題。請回答：

I.下而是與動物細胞工程有關的問題，請分析回答：

(1)在進行動物細胞培養(yǎng)時，首先要將動物組織剪碎，然后用___處理，以使其分散成單個細胞，制成細胞懸液。

(2)氣體環(huán)憧中CO2的作用是_________。

(3)應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞.原因是10代以后細胞可能發(fā)生___________。

(4)單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有________的特點。

II.轉基因抗病香蕉的培育過程如下圖所示，圖中I.、I、EcoRI、ApaI等為限制酶，質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點。下圖表示四種限制酶的識別序列及酶切點。

(1)若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaI對圖中對應的位點進行切割?_______。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstI、 ApaI限制酶切割質(zhì)粒?_________。

(2)卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，根據(jù)這一原理可以利用含卡那霉素的培基篩選已導入重組質(zhì)粒的香蕉細胞，由此推斷重組質(zhì)粒中應含有___基因。作為標記基因。

(3)②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基?_______ 。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶 維持培養(yǎng)液pH 遺傳物質(zhì)的突變 特異性強，靈敏度高 不能 不能 抗卡那霉素 不能

【解析】分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，其中SmaⅠ酶的切割位點位于抗病基因（目的基因）上；質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點，所以要活動重組質(zhì)粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進行切割，①→②表示脫分化過程、②→③表示再分化過程、④是新植體。

Ⅰ、（1）在進行動物細胞培養(yǎng)時，首先要將動物組織剪碎，然后用胰蛋白酶處理，以使其分散成單個細胞，制成細胞懸液。

（2）氣體環(huán)境中CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH．

（3）應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是10代以后細胞沒有發(fā)生遺傳物質(zhì)的突變，能保持正常的二倍體核型。

（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，優(yōu)點是：特異性強，靈敏度高，可大量制備。

Ⅱ、（1）因為限制酶SmaⅠ的切割位點位于抗病基因上，對SmaⅠ位點進行切割破壞了抗病基因的結構，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應的位點進行切割．要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，也不能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒，因為含有抗病基因的外源DNA分子上沒有ApaⅠ限制酶切割位點。

（2）欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，重組質(zhì)粒中應同時含有抗卡那霉素基因，作為標記基因。

（3）決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要．②、③階段培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比值不同，因此這兩個階段不能是用同種培養(yǎng)基。