Question

【題目】我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過(guò)基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)．圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過(guò)程示意圖，請(qǐng)分析回答：

（1）鐵結(jié)合蛋白基因來(lái)自菜豆，且基因的脫氧核苷酸序列已知，可以用法獲得此目的基因或用擴(kuò)增目的基因．
（2）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)，通常要用分別切割 ． 將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入．
（3）將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得；培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是 ． 檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻 ．
（4）為研究外源基因的遺傳方式，將To代植株上收獲的種子種植成T1代株系，檢測(cè)各單株的潮霉素抗性．在檢測(cè)的多數(shù)T1代株系內(nèi)，抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為3：1，此結(jié)果說(shuō)明外源基因的遺傳符合 ． 有少數(shù)T1代株系的所有植株都表現(xiàn)為對(duì)潮霉素敏感，但其體內(nèi)能檢測(cè)到鐵結(jié)合蛋白基因，造成這一結(jié)果最可能的原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）化學(xué)合成,PCR
（2）限制性核酸內(nèi)切酶,含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,CaCL2
（3）含有重組質(zhì)粒（有潮霉素抗性）的愈傷組織,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例,成熟種子中鐵含量
（4）基因分離,潮霉素抗性基因沒(méi)有表達(dá)（或“潮霉素抗性基因丟失”）
【解析】解：（l）獲取目的基因的方法有三種：①?gòu)幕�因文�?kù)中獲取 ②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增 ③人工合成（化學(xué)合成）．如果基因的脫氧核苷酸序列已知，可以用化學(xué)合成法獲得此目的基因，再用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增．（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，通常要用同一種限制酶分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端，然后再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒．將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用CaCl2溶液處理農(nóng)桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞，易于重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入．（3）質(zhì)粒上的標(biāo)記基因?yàn)槌泵顾乜剐曰�因，因此通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質(zhì)粒的愈傷組織．培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的區(qū)別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例不同．檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻成熟種子中鐵含量．（4）細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后，可將該細(xì)胞認(rèn)為是攜帶目的基因的雜合子，自交后代中，抗潮霉素植株與潮霉素敏感植株的比例為3：1，此結(jié)果說(shuō)明外源基因的遺傳符合基因的分離定律．如果體內(nèi)能檢測(cè)到鐵結(jié)合蛋白基因，而表現(xiàn)為對(duì)潮霉素敏感，最有可能的就是潮霉素抗性基因沒(méi)有表達(dá)或者潮霉素抗性基因丟失．

所以答案是：（1）化學(xué)合成 PCR （2）限制性核酸內(nèi)切酶 含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒 CaCL2 （3）含有重組質(zhì)粒（有潮霉素抗性）的愈傷組織 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例 成熟種子中鐵含量 （4）基因分離 潮霉素抗性基因沒(méi)有表達(dá)（或“潮霉素抗性基因丟失”）

【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解基因的分離規(guī)律的實(shí)質(zhì)及應(yīng)用(基因的分離定律的實(shí)質(zhì)是：在雜合體的細(xì)胞中，位于一對(duì)同源染色體上的 等位 基因，具有一定的獨(dú)立性，在減數(shù)分裂形成配子的過(guò)程中，等位基因會(huì)隨同源染色體的分開(kāi)而分離，分別進(jìn)入兩個(gè)配子中，獨(dú)立地隨配子傳給后代)，還要掌握基因工程的應(yīng)用(植物基因工程：抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)；動(dòng)物基因工程：提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物；基因治療：把正常的外源基因?qū)�入病人體內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用)的相關(guān)知識(shí)才是答題的關(guān)鍵．