Question

【題目】Ⅰ型糖尿病又名胰島素依賴型糖尿�。↖DDM），Ⅰ型糖尿病病人自身不能產(chǎn)生胰島素，所以病人從發(fā)病開始就需使用胰島素治療，并且終身使用，因此臨床上對胰島素需求量很大。如圖是利用奶牛乳腺生物反應(yīng)器制備胰島素的流程圖，據(jù)圖回答下列問題：

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時，為避免人胰島素基因末端發(fā)生任意連接和載體的自身環(huán)化應(yīng)選用_______________________酶切處理目的基因和載體。要使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異性表達，應(yīng)將人胰島素基因與_____________________________等調(diào)控元件重組在一起。

（2）②過程采集的奶牛精子常用________________法使其獲能，與成熟的卵子在專用受精溶液中完成受精，受精過程中，在精子觸及________________的瞬間會產(chǎn)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精子入卵受精的第一道屏障。④過程常用的方法是___________________。

（3）對移植前的胚胎需進行性別鑒定，一般采用SRYPCR方法，選擇出現(xiàn)_________（填“陽性”或“陰性”）反應(yīng)的胚胎進行移植。為了使胚胎移植能成功，需要對代孕奶牛C進行_________________處理，使之與供體的生理狀況保持相同。

（4）如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，采用的生物技術(shù)是_____________________。

Answer 1

【答案】PstⅠ、SmaⅠ 奶牛乳腺蛋白基因的啟動子 化學(xué)誘導(dǎo) 卵細胞膜 顯微注射法 陰性 同期發(fā)情 動物體細胞核移植技術(shù)

【解析】

題圖中有體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植和基因工程等生物工程。圖中①表示超數(shù)排卵，獲取卵細胞，②表示獲取精子，③表示受精作用，④表示目的基因?qū)�入受體細胞，⑤表示胚胎移植。

（1）為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，不能用同一種限制酶切割質(zhì)�；蚰康幕�因，應(yīng)該選用兩種限制酶，且要保證不破壞目的基因，因此應(yīng)該選用限制酶PstⅠ、SmaⅠ分別對含人胰島素基因的DNA和載體進行切割。要使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異表達，應(yīng)將人胰島素基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起。

（2）②過程采集的奶牛精子必須要先進行精子獲能，常用的方法是化學(xué)誘導(dǎo)法，受精過程中，在精子觸及卵細胞膜的瞬間會產(chǎn)生透明帶反應(yīng)，這是防止多精子入卵的第一道屏障。④表示目的基因?qū)�入受體細胞，受體細胞是動物細胞時，常采用的方法是顯微注射法。

（3）對移植前的胚胎需進行性別鑒定，一般采用SRY-PCR方法，因為是要利用奶牛乳腺生物反應(yīng)器制備胰島素，因此選擇出現(xiàn)陰性反應(yīng)的雌性胚胎進行移植。胚胎移植時，需使受體與供體的生理狀況保持相同，需要對代孕奶牛C進行同期發(fā)情處理。

（4）動物體細胞核移植技術(shù)可以加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育。