Question

【題目】I．胰島素A、B鏈分別表達(dá)法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。如圖是該方法所用的基因表達(dá)載體，請回答下列問題：

（1）圖中基因表達(dá)載體中沒有標(biāo)注出來的基本結(jié)構(gòu)是________。

（2）圖中啟動(dòng)子是____________識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá)；氨芐青霉素抗性基因的作用是________________________。

（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具酶有__________________________。

（4）β﹣半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá)，可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部，其意義在于___________________________。

（5）溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵，用溴化氰處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈，且β﹣半乳糖苷酶被切成多個(gè)肽段，其原因可能是________________。

II. 人工種子是人們模仿天然種子的結(jié)構(gòu)制造出來的生命有機(jī)體，它能像天然種子一樣萌發(fā)生長。人工種子的核心部分是胚狀體。其培育過程如圖所示。

（1）制作人工種子依據(jù)的原理是_______________。

（2）某二倍體植物基因型為DdTt，利用花藥離體培養(yǎng)的方法，可培育成“花粉胚”，也可制成人工種子，這種種子萌發(fā)形成的個(gè)體稱為_________，從生殖類型看屬于_______生殖。

Answer 1

【答案】 終止子 RNA 聚合 作為標(biāo)記基因，將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來 限制酶和DNA 連接酶 防止胰島素的 A、B 鏈被（菌體內(nèi)）蛋白酶降解 β﹣半乳糖苷酶中含多個(gè)甲硫氨酸，而胰島素 A、B 鏈中不含甲硫氨酸 植物細(xì)胞全能性 單倍體 有性

【解析】試題分析：I．.本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。II.植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。分析題圖：圖中①②為脫分化過程，③為再分化過程。

I．（1）根據(jù)題意和圖示分析可知：圖1基因表達(dá)載體中已有目的基因、啟動(dòng)子和標(biāo)記基因，所以沒有標(biāo)注出來的基本結(jié)構(gòu)是終止子。

（2）圖1中啟動(dòng)子是RNA聚合酶酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá)即轉(zhuǎn)錄過程。氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因，將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來。

（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，必須用相同的限制酶切割（含目的基因的外源DNA分子）和運(yùn)載體，以產(chǎn)生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。

（4）β-半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá)，可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部，這樣可以防止胰島素的A、B鏈被菌體內(nèi)蛋白酶降解。

（5）溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵，由于β-半乳糖苷酶中含有多個(gè)甲硫氨酸，而胰島素的A、B鏈中不含甲硫氨酸，所以用溴化氰處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈，且β-半乳糖苷酸被切成多個(gè)肽段。

II.（1）制作人工種子需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是植物細(xì)胞具有全能性。

（2）由花粉直接培養(yǎng)形成的植株為單倍體，花粉是減數(shù)分裂形成的，因此從生殖方式看屬于有性生殖。