Question

8．某科研小組利用轉基因技術，將豌豆的A（抗蟲基因）導入玉米體細胞．以獲得具有抗蟲性狀的新品種．請回答下列問題．
（1）若要從豌豆中獲得抗蟲基因，可首先建立豌豆的基因組文庫，再從中篩選出所需的抗蟲基因．理論上，基因組文庫含有生物的全部基因，cDNA文庫中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技術擴增抗蟲基因時，需要在反應體系中添加的有機物有DNA模板、2種引物、4種脫氧核苷酸和耐熱的DNA聚合酶，擴增過程可以在PCR擴增儀中完成．
（3）導入抗蟲基因的玉米細胞通過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)成完整植株，該技術包括脫分化和再分化兩個階段．
（4）若要檢查雜交細胞中是否具有A基因，在分子水平上，常采用DNA分子雜交技術，該技術用到DNA分子探針，常用同位素（同位素標記）或熒光標記．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、植物組織培養(yǎng)的過程：外植體$\stackrel{脫分化}{→}$愈傷組織$\stackrel{再分化}{→}$胚狀體→新植體．

解答 解：（1）若要從豌豆中獲得抗蟲基因，可首先建立豌豆的基因組文庫，再從中篩選出所需的抗蟲基因．基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫，其中基因組文庫含有生物的全部基因，而部分基因文庫（如cDNA文庫）中含有生物的部分基因．
（2）利用PCR技術擴增目的基因的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、2種引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（3）將轉基因植物細胞培育成轉基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術，該技術包括脫分化和再分化兩個階段．
（4）要檢查雜交細胞中是否具有A基因，可采用DNA分子雜交技術，該技術用到DNA分子探針，常用同位素或熒光標記．
故答案為：
（1）篩選  部分
（2）DNA模板    2種引物
（3）植物組織培養(yǎng)   脫分化    再分化
（4）DNA分子雜交    同位素（同位素標記）

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中的相關細節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的過程及相關應用，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．