Question

【生物-選修1生物技術(shù)實踐】
某研究小組設(shè)計了以下實驗探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．實驗步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如表所示．請分析回答問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4?7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選

 

，這種培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．
（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的

 

和

 

，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是

 

．
（3）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用

 

的方法接種，獲得

 

后繼續(xù)篩選．
（4）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手．需要滅菌的是

 

；需要消毒的是

 

．（填序號）
（5）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌的實驗時，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落．A同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有

 

（填序號）．
①由于土樣不同 �、谟捎谂囵B(yǎng)基污染     ③由于操作失誤 �、軟]有設(shè)置對照
（6）在該實驗中，可以通過檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是

 

．所用方法是在培養(yǎng)基中加入

 

，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成紅色．

Answer 1

考點：以尿素為氮源，測定能生長的細(xì)菌的數(shù)量,微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：本題是對用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方及營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、常用的接種方法、無菌操作技術(shù)、對分解尿素的菌的鑒定等相關(guān)知識的綜合性考查，回憶微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方和營養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作、常用的接種方法的具體操作和目的，無菌操作技術(shù)、對分解尿素的菌的鑒然后結(jié)合問題進(jìn)行解答．

解答： 解：（1）該實驗的目的是篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌），不能分解尿素的細(xì)菌將因缺少氮源無法生長繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）目的菌生長繁殖需要的氮源來自尿素，碳源來自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需要微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)．
（3）固體培養(yǎng)基上常用的接種方法是稀釋涂布法和平板劃線法；通過稀釋涂布法或者平板劃線法逐漸稀釋，當(dāng)稀釋度足夠大時可以獲得由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落，然后進(jìn)行挑選．
（4）為了保證培養(yǎng)物不被污染，對培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管要進(jìn)行滅菌，實驗操作者的雙手要進(jìn)行消毒．
（5）由題意知，該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實驗過程中沒有進(jìn)行無菌操作．
（6）尿素被分解尿素的菌氧化成氨氣，氨氣會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，指示劑酚紅變紅，因此以通過在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解．
故答案為：
（1）目的菌　選擇
（2）尿素　葡萄糖　為目的菌提供氧氣
（3）涂布平板（劃線）    單菌落
（4）①②③
（5）①②③
（6）微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高　酚紅指示劑

點評：對于微生物培養(yǎng)技術(shù)的掌握及分解尿素的菌的分離和計數(shù)的掌握應(yīng)用是解題的關(guān)鍵．