【題目】科學(xué)家將擬南芥的抗寒基因(CBFl)轉(zhuǎn)入香蕉以獲得抗寒的香蕉品種。如圖是某質(zhì)粒載體上的SacⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ四種限制酶的切割位點(diǎn)示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)為構(gòu)建基因表達(dá)載體,用限制酶SacⅠ、XbaⅠ切割含目的基因的DNA片段獲得了CBFl基因,同時(shí)要用限制酶__對(duì)質(zhì)粒載體進(jìn)行切割,目的是__,這種采用雙酶切的方法構(gòu)建基因表達(dá)載體的優(yōu)點(diǎn)是使目的基因與載體__,并能防止目的基因或載體的自身環(huán)化。

(2)將CBFl基因連接到圖示質(zhì)粒后,作為基因表達(dá)載體,其組成還必須有__,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入香蕉細(xì)胞最常用的方法是__。

(3)為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有CBFl基因,可用含__的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

(4)科學(xué)家將生長(zhǎng)健壯、苗齡一致的轉(zhuǎn)基因香蕉(實(shí)驗(yàn)組)與非轉(zhuǎn)基因香蕉(對(duì)照組)進(jìn)行____處理,鑒定兩組之間的抗寒性差異,如果__,則說(shuō)明獲得了抗寒的香蕉優(yōu)質(zhì)品種。

【答案】SacⅠ、XbaⅠ 獲得相同的(黏性)末端 定向連接 啟動(dòng)子和終止子 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 氨芐青霉素 低溫 實(shí)驗(yàn)組的抗寒能力明顯高于對(duì)照組

【解析】

在構(gòu)建基因表達(dá)載體中,如果目的基因和載體用同一種限制酶切割,獲得的黏性末端相同,將會(huì)發(fā)生自身環(huán)化現(xiàn)象,故應(yīng)選用不同的限制酶分別對(duì)目的基因和載體切割,以獲得不同的黏性末端。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法。

(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)該用同種限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體,因此為構(gòu)建基因表達(dá)載體,用SacI、XbaI切下CBFl基因后,對(duì)質(zhì)粒載體進(jìn)行切割的限制酶也是SacI、XbaI,這樣可以產(chǎn)生相應(yīng)的黏性末端,便于DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體定向連接形成重組DNA,并能防止目的基因或載體的自身環(huán)化。

(2)基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、目的基因等。CBFl基因?yàn)槟康幕颍瑘D中質(zhì)粒上含標(biāo)記基因,故作為基因表達(dá)載體,其組成還必須有啟動(dòng)子和終止子。香蕉細(xì)胞是植物細(xì)胞,將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
(3)據(jù)圖分析,質(zhì)粒上的標(biāo)記基因是氨芐青霉素抗性基因,所以為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有CBF1基因,可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
(4)根據(jù)題干信息可知,目的基因是抗寒基因,所以科學(xué)家將生長(zhǎng)健壯、苗齡一致的轉(zhuǎn)基因香蕉(實(shí)驗(yàn)組)與非轉(zhuǎn)基因香蕉(對(duì)照組)進(jìn)行低溫處理。比較兩組之間的抗寒性差異。如果實(shí)驗(yàn)組的抗寒能力明顯高于對(duì)照組,則說(shuō)明獲得了抗寒的香蕉優(yōu)質(zhì)品種。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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A.兩者所含的基因表達(dá)情況不同B.兩者所處的細(xì)胞周期長(zhǎng)短不同

C.兩者所含的各細(xì)胞器數(shù)量不同D.兩者所含的特定蛋白種類(lèi)不同

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【題目】下圖為三種質(zhì)粒和一個(gè)含目的基因的片段的示意圖。復(fù)制原點(diǎn)是質(zhì)粒能正常復(fù)制的必 需組成。圖中 Ap 為氨芐青霉素抗性基因,Tc 為四環(huán)素抗性基因, lacZ 為藍(lán)色顯色基因。 EcoR Ⅰ、 PvuⅠ為相應(yīng)的限制酶切割位點(diǎn),括號(hào)內(nèi)的數(shù)據(jù)是該切點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離,單位為 kb(1 kb= 1000 個(gè)堿基對(duì)長(zhǎng)度)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)用圖中的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)該選擇質(zhì)粒_______,選擇的限制酶 是_______

(2)如果選擇的質(zhì)粒與目的基因重組成功,并且在受體細(xì)胞中能正常表達(dá),則所形成的重組質(zhì)粒 用 EcoRI 完全酶切,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)的片段長(zhǎng)度有___________。

(3)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌時(shí),可將大腸桿菌先用 處理。導(dǎo)入大腸桿菌后,為了篩選 出含目的基因的大腸桿菌,在普通瓊脂培養(yǎng)基中還需加入______,形成的菌落顏色為_______ 。

(4)如果要檢測(cè)導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì),可以采用_____ 法。

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A. 生長(zhǎng)素類(lèi)似物可促進(jìn)葉片生長(zhǎng),抑制傳粉受精

B. 生長(zhǎng)素類(lèi)似物可抑制花、果實(shí)的發(fā)育和脫落

C. 低濃度的生長(zhǎng)素類(lèi)似物可促進(jìn)花、果實(shí)的發(fā)育而使其脫落

D. 高濃度的生長(zhǎng)素類(lèi)似物可抑制花、果實(shí)的發(fā)育而使其脫落

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組別

頂芽處理

側(cè)芽處理

A

去除

2 mg/L 激動(dòng)素溶液涂抹

B

保留

2 mg/L 激動(dòng)素溶液涂抹

C

保留

蒸餾水涂抹

回答下列問(wèn)題:

(1)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,頂芽能抑制側(cè)芽生長(zhǎng),這種現(xiàn)象稱(chēng)為______。

(2)A組側(cè)芽附近的生長(zhǎng)素濃度______(填“高于”“低于”或“等于”)B組相應(yīng)側(cè)芽附近的生長(zhǎng)素濃度,原因是______

(3)為了驗(yàn)證激動(dòng)素對(duì)A組側(cè)芽生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,還應(yīng)該增加一個(gè)處理組D,D組的處理是______,預(yù)測(cè)該處理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是:D組側(cè)芽生長(zhǎng)量______(填“大于”“小于”或“等于”)A組的生長(zhǎng)量。

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【題目】下面為動(dòng)物機(jī)體的細(xì)胞凋亡及清除示意圖。據(jù)圖分析,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A. ①過(guò)程表明細(xì)胞凋亡是特異性的,體現(xiàn)了生物膜的信息傳遞功能

B. ②過(guò)程中凋亡細(xì)胞被吞噬,表明細(xì)胞凋亡是細(xì)胞被動(dòng)死亡過(guò)程

C. 癌細(xì)胞不能進(jìn)行正常的分化,機(jī)體清除癌細(xì)胞與細(xì)胞凋亡有關(guān)

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