Question

12．如圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程，請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：

（1）若限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-↓GATC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-G↓GATCC-，那么在①過程中，應(yīng)用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒，用限制酶Ⅰ切割抗蟲基因．①過程在體外（體內(nèi)/體外）進(jìn)行．
（2）將通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入，該培養(yǎng)基從功能方面屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是大量復(fù)制目的基因．
（4）⑤過程所用技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)，從遺傳學(xué)角度來看，根本原因是根細(xì)胞具有含有本物種全部基因．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖中目的基因的左右兩側(cè)分別有限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的識別序列；并且質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因上有限制酶Ⅰ的識別序列，氨芐青霉素抗性基因上具有限制酶Ⅱ的識別序列．并且兩種識別序列的末端是相同的．
圖中過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，②表示目的基因?qū)�入大腸桿菌，③表示目的基因?qū)�入土壤農(nóng)桿菌，④表示目的基因?qū)�入植物的根�?xì)胞，⑤表示通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得完成植株．

解答 解：（1）質(zhì)粒中兩個標(biāo)記基因中均有限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-↓GATC-，若用該酶切，抗性基因均被破壞，因此用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒；目的基因可以用限制酶Ⅰ或兩種酶一起切割，由于兩種切割形成的末端序列相同，因此可以連接．①基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程在體外進(jìn)行．
（2）用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒，破壞了質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因，因此標(biāo)記基因是四環(huán)素抗性基因，所以應(yīng)有含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上．
（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是大量復(fù)制目的基因．
（4）⑤所示的由一個植物細(xì)胞發(fā)育為一個完整的植株的技術(shù)叫植物組織培養(yǎng)，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，而根本原因細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個體的全部遺傳物質(zhì)．
故答案為：
（1）ⅡⅠ體外
（2）四環(huán)素        選擇
（3）大量復(fù)制目的基因
（4）植物組織培養(yǎng)   含有本物種全部基因

點評 本題具有一定的綜合性，難度適中，考查了基因表達(dá)載體的構(gòu)建、限制酶的作用特點、基因分離定律的應(yīng)用以及植物組織培養(yǎng)技術(shù)等方面的知識，本題將多個知識點有機(jī)整合，既要求考生具有一定的識圖能力、分析能力、理解能力，又要求考生能識記相關(guān)基礎(chǔ)知識．