Question

【題目】禽流感病毒為RNA病毒，可以侵入禽類細胞中進行增殖，還可以跨種間感染人與哺乳動物，如感染人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，臨床表現(xiàn)為神經(jīng)嗜性和高致病性。研究人員以野生型H9N2禽流感病毒為模式毒株，以小鼠為哺乳動物模型，在死亡小鼠體內分離出H9N2禽流感病毒，稱之為H9N2鼠適應性病毒。請回答問題：

（1）為研究H9N2鼠適應性病毒對小鼠的致病性，研究人員將一定量的H9N2鼠適應性病毒注入實驗組小鼠體內，同時分別將等量的_______________、H9N2禽流感模式病毒注入另外兩組小鼠作為空白對照和標準對照。接種后14天內每天觀察癥狀，記錄體重，小鼠體重下降超過30%則判定死亡，繪制小鼠存活率曲線：

結果表明：H9N2鼠適應性病毒感染小鼠后，與標準對照組相比，小鼠體重______________，存活率______________。說明_________________________________________。

（2）為研究H9N2鼠適應性病毒對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染性和其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的增殖能力，在感染后的第3天和第5天，剖殺小鼠收集腦組織，研磨處理后檢測上清液中病毒濃度的變化，繪制表格如下：

時間（天）	H9N2鼠適應性病毒濃度（pfu)
	實驗組	標準對照組
3	0.1	0
5	3.1	0

實驗結果表明H9N2鼠適應性病毒能夠侵染神經(jīng)細胞并進行增殖，主要依據(jù)是_________。

（3）為進一步研究H9N2鼠適應性病毒對小鼠神經(jīng)嗜性影響的關鍵基因片段。研究人員通過________獲得病毒的DNA分子，設計______________，通過PCR的方法獲得H9N2鼠適應性病毒的基因組，與H9N2禽流感模式病毒基因組進行比較，發(fā)現(xiàn)其中涉及到PB2蛋白基因的突變和HA蛋白基因的突變。

（4）為研究PB2蛋白突變基因的作用，研究人員構建了PB2蛋白基因突變的病毒，與野生型病毒分別侵染兩組小鼠，采用抗原一抗體雜交的方法統(tǒng)計PB2蛋白的含量如下表所示：

	2小時	4小時	6小時	8小時	10小時
野生型	-	-	+	+ +	+ +
突變型	-	+ +	+ + +	+ + + +	+ + + + +

（一表示未檢測出PB2蛋白，+表示PB2蛋白的沉淀量）

實驗結果表明：PB2蛋白基因的突變可以_____________PB2蛋白的合成。進一步研究發(fā)現(xiàn)，PB2蛋白含量與病毒在細胞中的增殖力呈正相關。

（5）為研究HA蛋白突變基因對病毒特異性侵染神經(jīng)細胞的作用，你認為實驗組的最佳操作步驟應該為___________。

a.HA基因突變的病毒b.野生型病毒c.侵染小鼠d.侵染小鼠神經(jīng)細胞培養(yǎng)液e.統(tǒng)計小鼠的存活率f.統(tǒng)計神經(jīng)細胞的存活率 g.顯微鏡觀察神經(jīng)細胞的形態(tài)變化

（6）根據(jù)上述研究結果推測，造成人類流感大流行的病毒可能由禽流感病毒進化而來，其原因是禽流感病毒通過______________的作用，能夠迅速適應新宿主并有效的感染和傳播。

Answer 1

【答案】 生理鹽水 下降 降低 與H9N2禽流感模式病毒相比，H9N2鼠適應病毒對小鼠的致病性更強 隨著時間的推移，小鼠腦神經(jīng)細胞中H9N2鼠適應性病毒的濃度升高 逆轉錄 多個引物對 促進 adfgf 自然選擇（選擇）

【解析】本題以針對禽流感病毒的相關實驗為背景，考查的知識點有特異性免疫、基因工程、和探究性實驗設計和現(xiàn)象分析，意在考查考生能運用所學知識，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷。

（1）根據(jù)實驗目的設置的對照組是注入等量的生理鹽水；據(jù)圖中曲線變化可知，標準對照組小鼠的體重先下降后基本恢復至原來體重，而H9N2鼠適應性病毒感染的小鼠體重一直下降，且始終低于標準對照組；空白對照組和標準對照組小鼠在實驗后存活率均為100%，而H9N2鼠適應性病毒感染的小鼠存活率下降直到全部死亡；通過實驗對比說明，與H9N2禽流感模式病毒相比，H9N2鼠適應病毒對小鼠的致病性更強。

（2）根據(jù)表格數(shù)據(jù)比較可知，實驗組小鼠腦組織中有病毒，且隨著時間的推移，小鼠腦神經(jīng)細胞中H9N2鼠適應性病毒的濃度在升高，說明H9N2鼠適應性病毒能夠侵染神經(jīng)細胞并進行增殖。

（3）H9N2禽流感病毒為RNA病毒，可通過逆轉錄獲得病毒的DNA分子，設計多個引物對，通過PCR的方法獲得H9N2鼠適應性病毒的基因組。

（4）由表格數(shù)據(jù)分析可知，含PB2蛋白基因突變病毒的小鼠體內，PB2蛋白合成更快、更多，說明PB2蛋白基因的突變可以促進PB2蛋白的合成。

（5）根據(jù)實驗課題“研究HA蛋白突變基因對病毒特異性侵染神經(jīng)細胞的作用”，實驗的自變量為有無HA蛋白突變基因的病毒，實驗組的操作為：用HA基因突變的病毒侵染小鼠神經(jīng)細胞培養(yǎng)液，一段時間后統(tǒng)計神經(jīng)細胞的存活率，并用顯微鏡觀察神經(jīng)細胞的形態(tài)變化，統(tǒng)計神經(jīng)細胞的存活率。

（6）禽流感病毒進化過程中，由于基因突變會產(chǎn)生可遺傳變異，在自然選擇作用下，能夠適應新宿主的病毒能有效的感染和傳播給人類，造成人類流感大流行。

[點睛]：本題屬于實驗類題型，解題關鍵是：1.設計實驗步驟：明確實驗課題，理解實驗原理，確定自變量和因變量，設置對照組和實驗組，控制無關變量，分析實驗現(xiàn)象得出結論；2.解讀題圖：對坐標圖的分析：a.先看橫、縱坐標，找出它們之間的關系；b.分析圖中每一條曲線的變化規(guī)律，并找出多條曲線之間變化的異同點；對表格數(shù)據(jù)分析：一是遵循實驗的對照原則和單一變量原則，看清數(shù)據(jù)的變化規(guī)律，如上升還是下降， 二是根據(jù)自變量分析數(shù)據(jù)變化原因，對于聯(lián)系教材的有關原理、概念等，盡可能用教材語言規(guī)范答題。