Question

13．從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定．富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法．
（1）接種前要對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理．在整個微生物的分離和培養(yǎng)過程中，一定要注意在無菌條件下進(jìn)行．
（2）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從富含纖維素的環(huán)境中采集．
（3）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制選擇培養(yǎng)基（按用途分類），該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的碳源．
（4）經(jīng)過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是剛果紅，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）．

Answer 1

分析 （1）微生物培養(yǎng)的程序：a．器具的滅菌、b．培養(yǎng)基的配制、c．培養(yǎng)基的滅菌、倒平板、d．微生物接種、e．恒溫箱中培養(yǎng)、f．菌種的保存；在培養(yǎng)的過程中一定要注意無菌操作．
（2）選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同而配制的．不同微生物對某些化學(xué)藥品的抵抗力不同．利用這些特點，我們便可配制出適于某些微生物生長而抑制其他微生物的選擇培養(yǎng)基，例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長；根據(jù)對營養(yǎng)物質(zhì)的特殊的需求，可以選擇不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素．
（3）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物．當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）微生物的培養(yǎng)最重要的程序之一就是防止雜菌的污染，防止雜菌的污染首先要對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理，培養(yǎng)基滅菌的方式是高壓蒸汽滅菌法；在微生物接種的操作中也要注意無菌操作．
（2）分離纖維素分解菌要從富含纖維素的環(huán)境中尋找，以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇，就可以分離到纖維素分解菌．
（3）以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）剛果紅可以和纖維結(jié)合形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌將纖維素分解以后，紅色復(fù)合物消失，會形成透明圈；純化土壤中的細(xì)菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌　無菌　
（2）富含纖維素　
（3）選擇　碳源　
（4）剛果紅　透明圈　菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）

點評 本題主要考查了培養(yǎng)基的制備、微生物的篩選與培養(yǎng)等有關(guān)知識，微生物的分離要根據(jù)微生物不同的嗜好，配制不同的培養(yǎng)基，在復(fù)習(xí)的過程中注意總結(jié)．