Question

6．在某實驗中選用YMA根瘤菌固體培養(yǎng)基來培養(yǎng)費氏中華根瘤菌（自生固氮菌），配方如表所示．

物質(zhì)	甘露醇	酵母粉	MgSO4•7H2O	K2HPO4	NaCl	CaCl2	H2O
劑量	13.861g	4.683g	0.099g	0.359g	0.335g	0.010g	1000mL

回答下列問題．
（1）按物理性質(zhì)，培養(yǎng)基可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基的配置過程具有如下步驟：①滅菌 ②計算 ③倒平板 ④調(diào)pH  ⑤稱量  ⑥溶化，正確是順序為②⑤⑥④①③．費氏中華根瘤菌以甘露醇作為碳源．
（2）想要測定某一時期活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進行計數(shù)．為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)．
（3）此實驗是如果防止污染的？在培養(yǎng)基中沒有加入氮源，這樣其他的微生物就不能在此培養(yǎng)基中長期生存．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分：

名稱	特征	功能
固體培養(yǎng)基	外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于微生物的分離、鑒定
液體培養(yǎng)基	呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于工業(yè)生產(chǎn)

2、兩種純化細(xì)菌的方法的比較

	優(yōu)點	缺點	適用范圍
平板劃 線分離法	可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離	不能計數(shù)	適用于好氧菌
稀釋涂布 平板法	可以計數(shù)，可以觀察菌落特征	吸收量較少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延	適用于厭氧，兼性厭氧

3、檢測培養(yǎng)液中細(xì)菌總數(shù)，可以看出采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法進行計數(shù)．用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細(xì)菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)．

解答 解：（1）按物理性質(zhì)，培養(yǎng)基可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基的正確順序為：②計算、⑤稱量、⑥溶化、④調(diào)pH、①滅菌、③倒平板．根據(jù)表格成分可知，費氏中華根瘤菌以甘露醇作為碳源．
（2）想要測定某一時期活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進行計數(shù)．為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)．
（3）該培養(yǎng)基中沒有加入氮源，這樣其他的微生物就不能在此培養(yǎng)基中長期生存，從而達(dá)到防治雜菌污染的效果．
故答案為：
（1）液體培養(yǎng)基   ②⑤⑥④①③甘露醇
（2）稀釋涂布平板    30～300
（3）在培養(yǎng)基中沒有加入氮源，這樣其他的微生物就不能在此培養(yǎng)基中長期生存．

點評 本題以培養(yǎng)基配方的表格為載體，考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、類型以及配置方法，掌握微生物分離、純化以及計數(shù)的方法，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題．