【題目】下圖表示轉(zhuǎn)基因煙草的培育過程。請據(jù)圖回答:

(1)圖示過程將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是_________________________。

(2)為便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有外源基因,攜帶外源基因的質(zhì)粒上應(yīng)有___________,還應(yīng)有____________________,以利于外源基因的表達。

(3)該過程中用到的植物細(xì)胞工程技術(shù)是__________,除用酒精對葉片進行消毒外,還需要用到___________溶液消毒。該技術(shù)的核心是_______________過程。

(4)外源基因的檢測首先要采用DNA分子雜交技術(shù)檢測______________________。

【答案】 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 標(biāo)記基因 啟動子和終止子 植物組織培養(yǎng) 次氯酸鈉 脫分化和再分化 轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了外源基因

【解析】試題分析:基因工程技術(shù)的基本步驟:

①目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

②基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

④目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù);個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

(1)由圖可知,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

(2)基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等,其中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中國是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。

(3)將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),其理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有全能性;該過程除用酒精對葉片進行消毒外,還需要用到次氯酸鈉溶液消毒。植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個重要的步驟。

(4)外源基因的檢測首先要采用DNA分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了外源基因。

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