Question

43.（10分）已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能破氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，促融獲得雜種細(xì)胞。請(qǐng)回答：

（1）試管中加入這兩種細(xì)胞后，還要加入誘導(dǎo)劑，除融合的雜種細(xì)胞外，還有__________種融合細(xì)胞，細(xì)胞融合所依據(jù)的原理是__________。

（2）設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說(shuō)明原理：

方法：在培養(yǎng)液中加入__________，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞。

原理：培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，下列細(xì)胞中，不能生長(zhǎng)的細(xì)胞有__________（寫序號(hào)），不能生長(zhǎng)的原因是__________，有的細(xì)胞能生長(zhǎng)，原因是__________。

①骨髓瘤細(xì)胞  ②融合的淋巴細(xì)胞  ③雜種細(xì)胞  ④融合的骨髓瘤細(xì)胞  ⑤淋巴細(xì)胞

（3）培養(yǎng)分離出的雜種細(xì)胞，培養(yǎng)液中除了有糖、氨基酸、水、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、促生長(zhǎng)因子外，還必須添加__________，同時(shí)還應(yīng)控制好培養(yǎng)液的溫度、__________（至少寫兩點(diǎn)）等外界環(huán)境條件。若出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制時(shí)，應(yīng)用__________處理后分瓶培養(yǎng)。

（4）將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)，獲得A、B、C三細(xì)胞株。各細(xì)胞株內(nèi)含有的人染色體如表（“+”有，“-”無(wú)），測(cè)定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活性。結(jié)果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均無(wú)e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因的影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第__________號(hào)染色體上。

細(xì)胞株	人染色體編號(hào)
	1	2	3	4	5	6	7	8
A株	+	+	+	+	-	-	-	-
B株	+	+	-	-	+	+	-	-
C株	+	-	+	-	+	-	+	-

Answer 1

43. （1）2  細(xì)胞膜的流動(dòng)性

    （2）氨基嘌呤   ①②④⑤    加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖

    人淋巴細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖。

    （3）動(dòng)物血清    PH、滲透壓、溶解氧    胰蛋白酶

    （4）6、1、2、7、8