Question

【題目】某質(zhì)粒上有SalⅠ、Hind Ⅲ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。

（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用兩種限制酶對進(jìn)行切割，然后進(jìn)行連接，以保證重組DNA序列的唯一性。
（2）為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入 ， 理由是。
（3）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用技術(shù)，即通過
和兩個(gè)主要過程最終形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加。

Answer 1

【答案】
（1）SalⅠ和HindⅢ；質(zhì)粒和抗鹽基因的DNA
（2）氨芐青霉素；重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞
（3）植物組織培養(yǎng)；脫分化；再分化；植物激素(植物生長調(diào)節(jié)劑或生長素和細(xì)胞分裂素)
【解析】（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)保證質(zhì)粒中的標(biāo)記基因至少保留一個(gè)不被破壞，且切割后質(zhì)粒與目的基因具有2的末端，還要避免質(zhì)粒自身相連，所以應(yīng)選用SalⅠ和HindⅢ兩種限制酶對質(zhì)粒和抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，然后進(jìn)行連接，以保證重組DNA序列的唯一性。（2）為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌 ，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素，理由是重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞。（3）將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，即通過脫分化和再分化兩個(gè)主要過程最終形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加植物生長調(diào)節(jié)劑或生長素和細(xì)胞分裂素，以誘導(dǎo)再分化的方向。
【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(shù)(基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù))．