(07天津卷)30.在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗基因(kan2)常作為標(biāo)記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下圖為獲得抗蟲(chóng)棉的技術(shù)流程。

請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)A過(guò)程需要的酶有                                               

(2)B過(guò)程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運(yùn)載體必須具備的兩個(gè)條件是                ;                          。

(3)C過(guò)程的培養(yǎng)基因除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加入          

(4)如果利用DNA分子雜交原理對(duì)再生植物進(jìn)行檢測(cè),D過(guò)程應(yīng)該用                                      作為探針。

(5)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。

①將轉(zhuǎn)基因植株與                  雜交,其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1∶1。

②若該轉(zhuǎn)基因植株自交,則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為    

③若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng),則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占       %。

答案:(1)限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶

(2)具有標(biāo)記基因    能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存

(3)卡那霉素

(4)放射性同位素(或熒光分子)標(biāo)記的抗蟲(chóng)基因

(5)①非轉(zhuǎn)基因植株    ②3∶1    ③100

解析:本題考查的知識(shí)點(diǎn)較多:植物的組織培養(yǎng)、基因工程、細(xì)胞核遺傳等。作為基因工程操作的基本步驟:目的基因與質(zhì)粒的重組,需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶才能完成,是否導(dǎo)入需要檢測(cè),因?yàn)闃?biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,所以在培養(yǎng)時(shí)除了在培養(yǎng)基中加入植物組織培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、植物激素外,還要加入卡那霉素,以便于檢測(cè)重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入離體的棉花葉片組織細(xì)胞中了。題目中已明確告訴我們,轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律,因此必為細(xì)胞核遺傳,由題意可知卡那霉素抗性基因?yàn)轱@性基因,獲得的轉(zhuǎn)基因植株為雜合體植株,所以產(chǎn)生的花藥有兩種類型,一種是抗卡那霉素型,一種是卡那霉素敏感型,且數(shù)量相等,因此放在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上離體培養(yǎng),只有抗卡那霉素型才能形成單倍體植株,即100%為抗卡那霉素型植株。

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