(8分)下圖(一)為某基因工程中利用的質(zhì)粒簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性?xún)?nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn),ampR為青霉素(抗生素)抗性基因,tctR為四環(huán)素(抗生素)抗性基因。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。下圖(二)為幾種酶作用于基因的位置。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)在基因工程中常用的工具有三種:一是用作切取目的基因的 酶;二是將目的基因與運(yùn)載體拼接的 酶;三是作為運(yùn)載體的質(zhì)粒。
(2)將含有目的基因的DNA與經(jīng)特定的酶切后的運(yùn)載體(質(zhì)粒)進(jìn)行拼接形成重組DNA,理論上講,重組DNA可能有:目的基因-目的基因、目的基因-運(yùn)載體和運(yùn)載體-運(yùn)載體三種,其中有效的(所需要的)重組DNA是 ,因此需要對(duì)這些拼接產(chǎn)物進(jìn)行分離提純。
(3)利用圖(一)所示的質(zhì)粒拼接形成的3種拼接產(chǎn)物(重組DNA)導(dǎo)入無(wú)任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞,并接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的拼接產(chǎn)物(重組DNA)是 。含有效的重組基因(目的基因-運(yùn)載體)的原核宿主細(xì)胞在含青霉素的培養(yǎng)基上_________(能/不能)生長(zhǎng)。
(4)在動(dòng)物基因工程中,將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的常用方法是 。
(5)圖(二)中,作用于a 位置的酶是 ;作用于b 位置的酶是 。
(1)限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶) DNA連接酶
(2)目的基因-運(yùn)載體
(3)運(yùn)載體-運(yùn)載體 能
(4)顯微注射法
(5)限制酶(限制性?xún)?nèi)切酶) DNA解旋酶
解析
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科目:高中生物 來(lái)源:2010年浙江省杭州學(xué)軍中學(xué)高三上學(xué)期第一次月考生物試題 題型:綜合題
(8分)為了解基因結(jié)構(gòu),通常選取一特定長(zhǎng)度的線(xiàn)性DNA分子,先用一種限制酶切割,通過(guò)電泳技術(shù)將單酶水解片段分離,計(jì)算相對(duì)大小;然后再用另一種酶對(duì)單酶水解片段進(jìn)行降解,分析片斷大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
已知 一線(xiàn)性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對(duì)) | 第一步水解 | 產(chǎn)物(單位bp) | 第二步水解 | 產(chǎn)物(單位bp) |
A切割酶 | 2100 | 將第一步水解分離后,分別用B酶切割 | 1900 200 | |
1400 | 800 600 | |||
1000 | 1000 | |||
500 | 500 | |||
B酶切割 | 2500 | 將第一步水解產(chǎn)物分離后,分別用A酶切割 | 1900 600 | |
1300 | 800 500 | |||
1200 | 1000 200 | |||
經(jīng)A酶和B酶同時(shí)切割 | 1900 1000 800 600 500 200 |
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
為了解基因結(jié)構(gòu),通常選取一特定長(zhǎng)度的線(xiàn)性DNA分子,先用一種限制酶切割,通過(guò)電泳技術(shù)將單酶水解片段分離,計(jì)算相對(duì)大;然后再用另一種酶對(duì)單酶水解片段進(jìn)行降解,分析片斷大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
已知 一線(xiàn)性DNA序列共有5000bp(bp為堿基對(duì)) | 第一步水解 | 產(chǎn)物(單位bp) | 第二步水解 | 產(chǎn)物(單位bp) |
A切割酶 | 2100 | 將第一步水解分離后,分別用B酶切割 | 1900 200 | |
1400 | 800 600 | |||
1000 | 1000 | |||
500 | 500 | |||
B酶切割 | 2500 | 將第一步水解產(chǎn)物分離后,分別用A酶切割 | 1900 600 | |
1300 | 800 500 | |||
1200 | 1000 200 | |||
經(jīng)A酶和B酶同時(shí)切割 | 1900 1000 800 600 500 200 |
(1)由實(shí)驗(yàn)可知,在這段已知序列上,A酶與B酶的識(shí)別序列分別為 個(gè)和 個(gè)。
(2)根據(jù)表中數(shù)據(jù),請(qǐng)?jiān)谙聢D中標(biāo)出相應(yīng)限制性酶的酶切位點(diǎn)并注明相關(guān)片斷的大小。
(3)已知BarnH I與BglⅡ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如下圖所示,用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有數(shù)個(gè)BarnH工和BglⅡ識(shí)別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作,若干循環(huán)后 和 序列明顯增多。
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