Question

17．植酸是常見(jiàn)的抗?fàn)I養(yǎng)因子，能阻止某些養(yǎng)分被利用．科學(xué)家將能降低植酸的植酸酶基因轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞中，獲得轉(zhuǎn)基因玉米．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）若要獲得植酸酶基因可以以植酸酶酶mRNA為模板，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程合成植酸酶基因．常用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該方法依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制（半保留復(fù)制）．
（2）構(gòu)建的植酸酶基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位，標(biāo)記基因的作用是鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞．
（3）將目的基因?qū)�入玉米�?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，欲檢測(cè)是否表達(dá)出植酸酶，應(yīng)采用的方法是抗原一抗體雜交法．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）若要獲得植酸酶基因可以以植酸酶酶mRNA為模板，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程合成植酸酶基因．PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制（半保留復(fù)制）．
（2）基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因，其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位，標(biāo)記基因的作用是鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞．
（3）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；欲檢測(cè)是否表達(dá)出植酸酶，應(yīng)采用的方法是抗原一抗體雜交法．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄     DNA雙鏈復(fù)制（半保留復(fù)制）
（2）終止子      RNA聚合酶        鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法      抗原一抗體雜交法

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．