Question

人類疾病的轉基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選．利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉基因模型大鼠的流程如圖所示．

（1）進行轉基因操作前，需用

 

酶短時處理大鼠組織，以便獲得單個細胞．
（2）卵母細胞除從活體輸卵管中采集外，還可從已處死的雌鼠

 

中獲取．
（3）圖中的高血壓相關基因作為

 

，質粒作為

 

，二者需用

 

切割后連接成重組載體，該過程與質粒上含有

 

有關．
（4）子代大鼠如果

 

和

 

，即可分別在分子水平和個體水平上說明高血壓相關基因已成功表達，然后可用其建立高血壓轉基因動物模型．
（5）在上述轉基因大鼠的培育過程中，所用到的主要胚胎工程技術是

 

、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,胚胎移植

專題：

分析：1．卵母細胞的采集和培養(yǎng)
主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精；第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞；第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞，叫活體采卵．采集的卵母細胞，都要在體外經人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精．
2．作為運載體必須具備的條件：
①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存．②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入．③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇．④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．
3．目的基因的檢測與鑒定，基因探針--用放射性同位素（或熒光分子）標記的含有目的基因DNA片段．
1）分子水平上的檢測
①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術
②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術
③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術
2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．（例：用蟲食用棉花，觀察其存活情況，來鑒定棉花是否具有抗蟲特性．）

解答： 解：（1）進行轉基因操作前，需用胰蛋白酶短時處理大鼠組織，以便獲得單個細胞．
（2）卵母細胞的采集和培養(yǎng)，主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞；第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞，叫活體采卵．
（3）本實驗是制備遺傳性高血壓轉基因模型大鼠，高血壓相關基因與質粒分別作為目的基因與載體．質粒具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入．
（4）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質或個體水平上的鑒定是否具有目的基因的相關的現狀，說明高血壓相關基因以成功表達．
（5）由圖可知，在這技術上所用到的主要胚胎工程技術是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植．
故答案為：
（1）胰蛋白酶
（2）卵巢
（3）目的基因    載體  限制酶   限制酶切割位點
（4）檢測到體內有相關蛋白   出現高血壓
（5）體外受精

點評：本題考查了基因工程、胚胎工程的相關內容，意在考查學生理解所學知識的要點，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用．