Question

【題目】某生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示．請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO47H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
瓊脂	15g
溶解后自來(lái)水定容到1000mL

（1）從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)分析，該培養(yǎng)基屬于；從培養(yǎng)基的用途分析，該培養(yǎng)基屬于 ．
（2）在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中：①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶、吸管；③瘤胃中液體；④涂布器．其中需要滅菌是（填序號(hào)）．
（3）分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落．甲同學(xué)堅(jiān)信自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是準(zhǔn)確的，則甲同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生差異的原因最可能是（填序號(hào)） ①取樣不同 ②培養(yǎng)基污染 ③操作失誤 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照
（4）為確定實(shí)驗(yàn)中微生物屬于尿素分解菌，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若菌落變成色，說(shuō)明瘤胃中的微生物能分解酵素．理由是 ．
（5）為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37°C恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計(jì)具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如表，其中倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數(shù)	103	104	105	106	107
菌落數(shù)	＞500	367	248	36	18

（6）若要在右圖實(shí)驗(yàn)中對(duì)瘤胃中的目的菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)采用什么計(jì)數(shù)法？ ， 該方法的缺點(diǎn)是容易導(dǎo)致結(jié)果偏小，請(qǐng)寫(xiě)出結(jié)果偏小的原因 ． （寫(xiě)出一項(xiàng)即可）

Answer 1

【答案】
（1）固體培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基
（2）①、②、④
（3）①
（4）紅；細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨,PH增高,使酚紅指示劑變紅
（5）106或105
（6）活菌計(jì)數(shù)法（或間接計(jì)數(shù)法）；兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞可能共同形成一個(gè)菌落,導(dǎo)致結(jié)果偏�。ㄒ恍┘�(xì)菌在培養(yǎng)過(guò)程中死亡后,不能形成菌落,導(dǎo)致結(jié)果偏小）
【解析】解：（1）分析表格，培養(yǎng)基成分中含有瓊脂作為凝固劑，因此從培養(yǎng)基的物理性質(zhì)分析，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；并且培養(yǎng)基中加入尿素為唯一氮源，因此從培養(yǎng)基的用途分析，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．（2）在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿，②玻棒、試管、錐形瓶、吸管，④涂布器需要滅菌處理，而③瘤胃中液體如果經(jīng)過(guò)滅菌將使其中的微生物全部死亡．（3）根據(jù)題意可知，甲同學(xué)堅(jiān)信自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是準(zhǔn)確的，則甲同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生差異的原因最可能是取樣不同．（4）細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅，因此以通過(guò)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷尿素是否被分解．（5）觀察并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)應(yīng)選30﹣300之間的培養(yǎng)皿進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，故應(yīng)選106或105倍的稀釋比較合適．（6）若要在右圖實(shí)驗(yàn)中對(duì)瘤胃中的目的菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)采用活菌計(jì)數(shù)法（或間接計(jì)數(shù)法），兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞可能共同形成一個(gè)菌落，導(dǎo)致結(jié)果偏�。�

所以答案是：（1）固體培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基 （2）①、②、④（3）①（4）紅 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，PH增高，使酚紅指示劑變紅（5）106或105（6）活菌計(jì)數(shù)法（或間接計(jì)數(shù)法） 兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞可能共同形成一個(gè)菌落，導(dǎo)致結(jié)果偏�。ㄒ恍┘�(xì)菌在培養(yǎng)過(guò)程中死亡后，不能形成菌落，導(dǎo)致結(jié)果偏�。�