Question

【題目】牛、羊等反芻動物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活著多種微生物，其中某些細菌能分解纖維素。為分離瘤胃中的纖維素分解菌，生物課外科研小組的同學開展了如下實驗。請分析回答下列問題：

（1）纖維素酶是由多種酶組成的復(fù)合酶，其中能催化纖維二糖水解的是__________。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進行定量測定。

（2）—般而言，配制細菌培養(yǎng)基時，除了加入水、無機鹽、碳源、氮源等主要營養(yǎng)成分之外，還應(yīng)添加適量的____________________。

（3）在稀釋涂布之前，可以將菌種樣液接種到液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是__________�？蒲行〗M的同學將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件，并持續(xù)通入無菌空氣，結(jié)果一段時間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒有菌種，原因是____________________。

（4）為篩選目的菌株，在倒平板時就加入剛果紅（CR），這種染色法的優(yōu)點是操作簡單，不存在______的問題，缺點是會形成假透明圈，原因是__________（答出一點即可）。

Answer 1

【答案】葡萄糖苷酶 葡萄糖 特殊營養(yǎng)物質(zhì)（生長因子、維生素） 增加纖維素分解菌（或目的菌）的濃度 瘤胃中的微生物為厭氧型，不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖 菌落混雜 產(chǎn)生淀粉酶的微生物或能降解色素的微生物也能產(chǎn)生透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分

【解析】

瘤胃中高度缺氧，所以生活在其中的微生物主要是厭氧厭氧型的微生物；篩選纖維素分解菌需要制備以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，纖維素酶是一種復(fù)合酶，主要包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶、CX酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶能把纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素分解菌的鑒定方法是剛果紅染色法，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。為確定得到的微生物是纖維素分解菌，還需進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種，纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定。

（1）纖維素酶是由多種酶組成的復(fù)合酶，包括C1酶、CX酶和葡糖苷酶，其中能催化纖維二糖水解的是葡萄糖苷酶。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定。

（2）—般而言，配制細菌培養(yǎng)基時，除了加入水、無機鹽、碳源、氮源等主要營養(yǎng)成分之外，還應(yīng)添加適量的特殊營養(yǎng)物質(zhì)如生長因子、維生素。

（3）在稀釋涂布之前，可以將菌種樣液接種到液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是增加纖維素分解菌（或目的菌）的濃度�？蒲行〗M的同學將瘤胃菌種提取液接種到適宜的培養(yǎng)液中，調(diào)節(jié)pH及溫度至適宜條件，并持續(xù)通入無菌空氣，結(jié)果一段時間后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液中幾乎沒有菌種，原因是瘤胃中的微生物為厭氧型，不能在有氧環(huán)境中生存、繁殖。

（4）為篩選目的菌株，在倒平板時就加入剛果紅（CR），這種染色法的優(yōu)點是操作簡單，不存在菌落混雜的問題，缺點是會形成假透明圈，原因是產(chǎn)生淀粉酶的微生物或能降解色素的微生物也能產(chǎn)生透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。