Question

【題目】某種廣泛被使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度一定，該除草劑的培養(yǎng)基不透明，培養(yǎng)皿中會(huì)殘留少量無菌空氣）

（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行__________處理。

（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、營養(yǎng)成分的角度要求上述培養(yǎng)基具備特點(diǎn)是____________________________。若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH，應(yīng)該在各種成分都溶化后且分裝_____（填“前”或“后”）進(jìn)行。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常采用的方法是__________。

（3）圖中形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源可能是__________，有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，據(jù)此可篩選出目的菌。

（4）若對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，常用的接種方法為__________。為了計(jì)數(shù)微生物的數(shù)量，一位同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為155、160、176、149個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為__________。

Answer 1

【答案】稀釋 以除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基 前 高壓蒸汽滅菌 N2 稀釋涂布平板法 1.6×109個(gè)

【解析】

分析題圖：該實(shí)驗(yàn)是從土壤中篩選分離能降解除草劑的微生物的過程。這樣的實(shí)驗(yàn)要將土壤稀釋處理，以除草劑為唯一的氮源進(jìn)行處理篩選土壤微生物，以菌落計(jì)數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)。

（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理。

（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、營養(yǎng)成分的角度要求上述培養(yǎng)基的特點(diǎn)是：固體培養(yǎng)基且以除草劑作唯一氮源；若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH，應(yīng)該在各種成分都溶化后且分裝前進(jìn)行；對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常采用高壓蒸汽滅菌法。

（3）根據(jù)題中信息“該除草劑的培養(yǎng)基不透明”，則可知無透明帶菌落利用的氮源并不是除草劑，而是來自空氣中的氮?dú)猓�有透明帶菌落利用的氮源為除草劑�?/span>

（4）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法還可用于對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)。在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為155、160、176、149個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為（155+160+176+149）÷4÷0.1×106=1.6×109個(gè)。