Question

【題目】草莓是我國(guó)的優(yōu)質(zhì)水果，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高，但卻容易受到病毒的感染�？茖W(xué)家利用細(xì)胞工程培育脫毒草莓或利用基因工程培育抗病毒草莓。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)為培育無(wú)病毒組培苗，通常選用植物的_____作材料，通過(guò)脫分化形成______，再分化獲得脫毒苗。該過(guò)程涉及的細(xì)胞分裂方式為_____________。

(2)基因工程中，構(gòu)建的基因表達(dá)載體除了具備復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還必須有____________。其中的啟動(dòng)子是_______識(shí)別和結(jié)合的部位。

(3)運(yùn)載體Ti質(zhì)粒中含有_________序列，可將目的基因整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上，要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA是否插入了目的基因，常采用____________技術(shù)，如果出現(xiàn)_________就表明目的基因已經(jīng)插入染色體DNA中。

Answer 1

【答案】莖尖(或根尖) 愈傷組織 有絲分裂 標(biāo)記基因 RNA聚合酶 T-DNA DNA分子雜交技術(shù) 雜交帶

【解析】

1、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其具體過(guò)程為：外植體 脫分化 愈傷組織再分化 胚狀體→新植體。

2、基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

(1) 植物的莖尖(或根尖)含病毒少，甚至沒(méi)有，為培育無(wú)病毒組培苗，通常選用植物的莖尖(或根尖)作材料，通過(guò)脫分化形成愈傷組織，再分化獲得脫毒苗。該過(guò)程進(jìn)行的是有絲分裂。

(2)基因工程中，構(gòu)建的基因表達(dá)載體除了具備復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、目的基因外，還必須有標(biāo)記基因。其中的啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。

(3)運(yùn)載體Ti質(zhì)粒中含有T-DNA序列，可將目的基因整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上，要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA是否插入了目的基因，常采用DNA分子雜交技術(shù)技術(shù)，如果出現(xiàn)雜交帶就表明目的基因已經(jīng)插入染色體DNA中。