Question

我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗，其有效成分是一種叫做乙肝表面抗原的蛋白質(zhì)（S蛋白，對應(yīng)的基因為S基因），請回答下列問題．
（1）在這項技術(shù)中，S基因?qū)儆?div id="8yl2ky8" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

．
（2）用

 

處理S基因和運載體，并用

 

使之結(jié)合，這里的DNA片段兩兩結(jié)合的產(chǎn)物有

 

種．
（3）將表達載體導(dǎo)入到哺乳動物細胞，篩選得到工程細胞．使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)工程細胞時，通常需要加入

 

等天然成分．工程細胞在生長過程中有

 

現(xiàn)象，需要定期使用

 

酶處理，以便于分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中，定期收集培養(yǎng)液，分離純化即可得到所需產(chǎn)品．
（4）由于哺乳動物細胞嬌嫩挑剔，培養(yǎng)較難，成本較高，近些年科學(xué)家們又發(fā)明了“乳腺生物發(fā)生器”，從飼養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因動物分泌的乳汁中提取所需產(chǎn)品．在這種技術(shù)中，構(gòu)建表達載體時需要將S基因與

 

等調(diào)控組件重組在一起，并將表達載體通過

 

的方式，導(dǎo)入到哺乳動物的

 

（填細胞名稱）．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),動物細胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
由于基因的選擇性表達，在利用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物時，要將藥用蛋白基因和乳腺組織特異性表達的啟動子等調(diào)控組件重組在一起．
動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
動物細胞培養(yǎng)關(guān)鍵詞辨析：
1、細胞貼壁：培養(yǎng)時，懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上．
2、細胞的接觸抑制：細胞表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖．（癌細胞無接觸抑制）

解答： 解：（1）在基因工程技術(shù)中，S基因?qū)儆谀康幕�因�?br />（2）在基因表達載體構(gòu)建的過程中，要用同一種限制酶處理S基因和運載體，并用DNA連接酶使之結(jié)合．由于目的基因和運載體均具有相同黏性末端，因此這里的DNA片段兩兩結(jié)合的產(chǎn)物有目的基因自身連接、運載體自身連接和重組質(zhì)粒3種．
（3）在對工程細胞進行動物細胞過程中，培養(yǎng)基中通常需要加入動物血清等天然成分．細胞在生長過程中有貼壁生長和接觸抑制現(xiàn)象，需要定期使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使細胞分散，以便于分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，在培養(yǎng)過程中，定期收集培養(yǎng)液，分離純化即可得到所需產(chǎn)品．
（4）由于哺乳動物細胞嬌嫩挑剔，培養(yǎng)較難，成本較高，近些年科學(xué)家們又發(fā)明了從飼養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因動物分泌的乳汁中提取所需產(chǎn)品．在“乳腺生物發(fā)生器”的技術(shù)中，構(gòu)建表達載體時需要將S基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起；一般動物細胞工程利用受精卵作為受體細胞，可以通過顯微注射法將表達載體導(dǎo)入受精卵．
故答案為：
（1）目的基因
（2）同一種限制酶    DNA連接酶   3
（3）動物血清   貼壁生長和接觸抑制    胰蛋白酶或膠原蛋白酶
（4）乳腺蛋白基因的啟動子   顯微注射   受精卵

點評：本題考查了基因工程以及細胞工程的相關(guān)知識，考生要識記基因工程的相關(guān)操作工具；識記動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分以及細胞培養(yǎng)的特點；識記動物基因工程的過程等相關(guān)知識，難度適中．