Question

8．人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體．已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原．其疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程如圖：

請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）過(guò)程①需要在逆轉(zhuǎn)錄酶酶的作用下進(jìn)行．
（2）過(guò)程②構(gòu)建A基因表過(guò)載體時(shí)，必須使用的兩種工具酶是限制性內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶．

培養(yǎng)基特殊成分	主要作用
次黃嘌呤	骨髓瘤細(xì)胞不能利用
氨基蝶嘌呤	阻斷DNA合成
胸腺嘧啶核苷	脾細(xì)胞可用于合成DNA

（3）過(guò)程③進(jìn)行的是細(xì)胞融合和篩選，體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性（填特性），與植物原生質(zhì)體融合相比，特有的促融方式是用滅活的仙臺(tái)病毒促融．篩選過(guò)程中，可在培養(yǎng)基中加入表中的成分來(lái)實(shí)現(xiàn)，其原理是：?jiǎn)渭兊墓撬枇黾?xì)胞因不能利用次黃嘌呤無(wú)法增殖，雜交瘤細(xì)胞可以增殖，培養(yǎng)基中能夠增殖的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞
（4）過(guò)程④的主要目的是通過(guò)選擇獲得X，X是能夠產(chǎn)生抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（5）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗．對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸（或基因）序列比較；或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；③是細(xì)胞融合過(guò)程；④是選擇培養(yǎng)過(guò)程；X為雜交瘤細(xì)胞．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與．
（2）構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割含有A基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，再用DNA連接酶連接A基因和運(yùn)載體形成A基因重組載體．
（3）細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）和化學(xué)法（聚乙二醇），而誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒），因此與植物原生質(zhì)體融合相比，特有的促融方式是用滅活的仙臺(tái)病毒促融．單純的骨髓瘤細(xì)胞因不能利用次黃嘌呤無(wú)法增殖，雜交瘤細(xì)胞可以增殖，培養(yǎng)基中能夠增殖的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞，因此篩選過(guò)程中，可在培養(yǎng)基中加入表中的成分來(lái)實(shí)現(xiàn)．
（4）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)之前，至少需要經(jīng)過(guò)兩次篩選，一次是用用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；另一次是用專一抗體檢測(cè)方法篩選出能產(chǎn)生抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（5）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗．對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較；或采用抗原-抗體雜交法，即用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄酶
（2）限制性內(nèi)切酶（或限制酶）和DNA連接酶
（3）一定的流動(dòng)性    用滅活的仙臺(tái)病毒促融     單純的骨髓瘤細(xì)胞因不能利用次黃嘌呤無(wú)法增殖，雜交瘤細(xì)胞可以增殖，培養(yǎng)基中能夠增殖的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞
（4）能夠產(chǎn)生抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞
（5）A蛋白核酸（或基因）序列     抗A蛋白的單克隆抗體

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程圖，考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．