Question

【題目】研究者在大豆突變體庫中篩選出純合突變體甲，并對其展開研究。

（1）γ射線照射可誘導(dǎo)大豆發(fā)生基因突變或__________，是構(gòu)建大豆突變體庫常用的誘變方法。突變體甲表現(xiàn)為葉皺縮型，如圖。

（2）以突變體甲與野生型大豆為親本，進(jìn)行正反交獲得F1。采用特異性引物對兩親本基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及F1植株進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。

據(jù)結(jié)果判斷，1～10中__________是雜交成功獲得的F1植株；推測F1中出現(xiàn)其它植株的原因是__________。F1自交收獲F2，發(fā)現(xiàn)突變型124株、野生型380株，說明突變體甲葉型突變的遺傳符合孟德爾的________定律。

（3）研究發(fā)現(xiàn)突變體甲是7號染色體片段缺失導(dǎo)致的，預(yù)測該缺失范圍內(nèi)有6個基因（記為基因1～6）最有可能與甲的葉皺縮有關(guān)，而這6個基因在8號染色體上均有功能類似的基因（記為基因1＇～6＇）。為確定基因1～6中與甲的葉皺縮直接相關(guān)的基因，研究者從野生型__________細(xì)胞中提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得DNA作為PCR模板進(jìn)行擴(kuò)增。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只擴(kuò)增出基因1～4，以及基因1＇、3＇、5＇、6＇，故鎖定基因__________作為重點研究對象，后命名為基因P和基因Q。

Answer 1

【答案】染色體變異 3,4,7,9 親本發(fā)生了自交 分離 葉肉 2和4

【解析】

1、PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。

2、DNA分子雜交的原理是利用了堿基互補(bǔ)配對的原則。

（1）γ射線可以誘發(fā)大豆發(fā)生基因突變或者染色體變異。

（2）將突變體甲與野生型大豆為親本，進(jìn)行正反交獲得F1，則F1中含有突變體甲和野生型大豆的基因，對照電泳圖，3,4,7,9含有雙親的基因，所以是雜交成功獲得的，其他植株只含有1個親本的基因型，可能是發(fā)生了自交。

F1自交收獲F2，發(fā)現(xiàn)突變型∶野生型≈1∶3，說明遵循孟德爾的分離定律。

（3）為確定基因1～6中與甲的葉皺縮直接相關(guān)的基因，基因的表達(dá)具有選擇性，所以需要從葉肉細(xì)胞中提取總RNA，在沒有缺失的8號染色體上只表達(dá)了1＇、3＇、5＇、6＇，所以2和4可能與葉片的皺縮有關(guān)。