【題目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值,只能從人血漿中制備。圖一是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA的兩條途徑,其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為相關(guān)限制酶的識別序列和切割位點(diǎn),以及HAS基因兩側(cè)的核苷酸序列。據(jù)圖回答下列問題:

1)依據(jù)圖一和圖二分析,在構(gòu)建基因表達(dá)載體時下列敘述錯誤的是_____

A.應(yīng)該使用酶B和酶C獲取HSA基因

B.應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒

C.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含1個酶A的識別位點(diǎn)

D.成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到2DNA片段

2PCR技術(shù)應(yīng)用的原理是____________,在利用該技術(shù)獲取目的基因的過程中,以從生物材料中提取的DNA作為模板,利用____________尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。

3)圖一過程中需將植物細(xì)胞與___________混合后共同培養(yǎng),旨在讓___________整合到植物細(xì)胞染色體DNA上;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含____________的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。

4)圖一過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞,采用最多,也是最為有效的方法是______________

5)為檢測HSA基因的表達(dá)情況,可提取受體細(xì)胞的 __________________,用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。

【答案】C DNA(雙鏈)復(fù)制 引物 農(nóng)桿菌 T-DNA 無色物質(zhì)K 顯微注射技術(shù) 蛋白質(zhì)

【解析】

基因工程的操作步驟:

1、獲得目的基因(目的基因的獲。

①從自然界中己有的物種中分離出來,如可從基因文庫中獲取。
②用人工的方法合成。
獲得原核細(xì)胞的目的基因可采取直接分離,獲取真核細(xì)胞的目的基因般人工合成。

人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。

③利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
PCR的含義:是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。

原理:DNA雙鏈復(fù)制

2、制備重組DNA分子(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)

①重組DNA分子的組成:除了目的基因外,還必須有標(biāo)記基因。

②方法:同種限制酶分別切割載體和目的基因,再用DNA連接酶把兩者連接。

3、轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞(將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞)
①轉(zhuǎn)化的概念:是且的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和衣達(dá)的過程。 ②常用的轉(zhuǎn)化方法:

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化技術(shù)(農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法),其次還有基因槍法和花粉管通道技術(shù)(花粉管通道法)。

將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法的受休細(xì)胞多為受精卵;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞: Ca2+處理法。
4、目的基因的檢測與鑒定
①首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。

②其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是采用分子雜交技術(shù)。

③最后檢測目的基因是翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用抗原一抗體雜交技術(shù)。

④講行個休生物學(xué)鑒定。

(1)

A、由圖中DNA序列和酶切位點(diǎn)序列可知應(yīng)使用酶B和酶C切割獲取HSA基因,A正確;

B、導(dǎo)入的目的基因時應(yīng)在T-DNA上,因此Ti質(zhì)粒應(yīng)用酶A和酶B切割,因?yàn)槊窤和酶C切出的黏性末端也能互補(bǔ)配對,可以將目的基因連接進(jìn)去,B正確;

C、成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含2個酶A的識別位點(diǎn),C錯誤;

D、成功構(gòu)建的重組質(zhì)粒用酶C處理能得到2個DNA片段,應(yīng)是A-C,和C-A片段,D正確。

故選C。

(2)PCR技術(shù)應(yīng)用的原理是DNA(雙鏈)復(fù)制,在利用該技術(shù)獲取目的基因的過程中,以從生物材料中提取的DNA作為模板,利用引物尋找HSA基因的位置并進(jìn)行擴(kuò)增。

(3)圖一過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),利用農(nóng)桿菌的侵染特性,讓T-DNA整合到植物細(xì)胞染色體DNA上;除盡農(nóng)桿菌后,為了篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞,利用重組質(zhì)粒上的報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色的特性,進(jìn)行篩選,故還須將植物細(xì)胞轉(zhuǎn)接到含無色物質(zhì)K的培養(yǎng)基上。

(4)圖一③過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞,通常采用較多的方法是顯微注射技術(shù)。

(5)為檢測HSA基因的表達(dá)情況,可利用抗原抗體雜交技術(shù),具體做法是:提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì),用抗血清白蛋白的抗體做雜交實(shí)驗(yàn)。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】將一個不含放射性同位素32P標(biāo)記的大腸桿菌(擬核DNA呈環(huán)狀,共含有m個堿基,其中有a個胸腺嘧啶)放在含有32P標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間,檢測到如圖Ⅰ、Ⅱ兩種類型的DNA(虛線表示含有放射性的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的敘述中正確的是(

A.DNA第二次復(fù)制產(chǎn)生的子代DNA有Ⅰ、Ⅱ兩種類型,比例為13

B.DNA復(fù)制后分配到兩個子細(xì)胞時,其上的基因遵循基因分離定律

C.復(fù)制n次需要胞嘧啶的數(shù)目是

D.復(fù)制n次形成的放射性脫氧核苷酸單鏈數(shù)為2n+1 -2

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖為人體細(xì)胞的分裂、分化、衰老和凋亡過程的示意圖,圖中①—⑥為各個時期的細(xì)胞,ac表示細(xì)胞所進(jìn)行的生理過程。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是( )

A. ⑤的基因型相同,蛋白質(zhì)的種類也相同

B. 細(xì)胞的衰老與凋亡就會引起人體衰老與死亡

C. ⑤⑥已失去分裂能力,則其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的流動方向?yàn)?/span>DNA→RNA→蛋白質(zhì)

D. 相比,的表面積與體積的比值增大,與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的能力增強(qiáng)

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某二倍體動物體內(nèi)處于某分裂時期的細(xì)胞模式圖如下。若不考慮基因突變和交叉互換,則圖表示細(xì)胞內(nèi)含有

A2個四分體 B2個染色體組

C2對同源染色體 D2對等位基因

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】為研究環(huán)境因素對某植株光合作用的影響,進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究,結(jié)果如圖所示。據(jù)圖分析,下列說法正確的是(

A.輕度遮陰條件下,該植株的CO2固定速率隨溫度升高而減小

B.“全光照、CO2濃度1%、30℃”是該植株實(shí)際光合作用的最適條件組合

C.“輕度遮陰、CO2濃度003%20℃”條件下,該植株葉肉細(xì)胞的CO2固定速率等于0

D.相同時間內(nèi),在“全光照、20℃”條件下,該植株在CO2濃度為1%時較CO2濃度為003%時產(chǎn)生的C3

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】在觀察細(xì)胞減數(shù)分裂圖像時,圖像中的同源染色體和姐妹染色單體不易區(qū)分,還需借助其他結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。如植物減數(shù)分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞全部包在胼胝體(由葡聚糖形成的透明包層)內(nèi),直到分裂結(jié)束,子細(xì)胞才分散。以下各圖是處于減數(shù)分裂不同時期的水仙細(xì)胞,下列敘述正確的是( 。

A.3所示細(xì)胞發(fā)生了同源染色體分離

B.9所示細(xì)胞發(fā)生姐妹染色單體分離

C.15、6所示細(xì)胞處于減數(shù)第一次分裂

D.27、8所示細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】加試題回答下列(一)、(二)小題:

(一)下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。

據(jù)圖回答:

1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是________(填字母代號)。

AampR B.啟動子    C.終止子 D.復(fù)制原點(diǎn)

3)過程①可采用的操作方法是_______(填字母代號)。

A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B.顯微注射 C.大腸桿菌轉(zhuǎn)化 D.細(xì)胞融合

4)過程②采用的生物技術(shù)是______。

5)對早期胚胎進(jìn)行切割,經(jīng)過程②可獲得多個新個體。這利用了細(xì)胞的_____性。

6)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá),可采用_____(填字母代號)技術(shù)。

A.核酸分子雜交 B.基因序列分析 CPCR D.抗原抗體雜交

(二)利用廢棄的秸稈生產(chǎn)燃料乙醇,不僅緩解了資源危機(jī)、環(huán)境污染,同時更為可持續(xù)發(fā)展提供了保證。下面是利用玉米秸稈來生產(chǎn)乙醇的流程:

1)從纖維素豐富的土壤中獲取微生物1,進(jìn)行一系列的操作后,用 _________ 將菌種涂布在相應(yīng)的固體培養(yǎng)基中。

2)下列有關(guān)涂布分離法的敘述錯誤的是_______

A.從土壤稀釋液中取樣時,不能只取懸液

B.接種時,涂布工具需先在酒精燈火焰上引燃

C.培養(yǎng)后菌落在整個平板表面分散均勻

D.涂布分離法比劃線分離法更易獲得單菌落

3)為了提高生產(chǎn)效率,也可通過培養(yǎng)微生物1獲得 ______________酶,并將該酶固定在某介質(zhì)上制成固定化酶。

4)微生物2通常是_______________,為了確保獲得產(chǎn)物乙醇,接種微生物2時要注意避免_____________,發(fā)酵時要注意_____________。這樣得到的乙醇濃度不會很高,最高是_________,所以要對生產(chǎn)出來的乙醇經(jīng)過蒸餾、提純等加工,才可以得到濃度大于90%的燃料乙醇。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某小組研究干旱對蠶豆葉片內(nèi)生長素和脫落酸濃度的影響,數(shù)據(jù)如圖所示,據(jù)圖分析可以得出的初步結(jié)論是( )

A. 正常情況下,蠶豆葉片中不產(chǎn)生脫落酸

B. 隨著干旱時間延長,蠶豆葉片內(nèi)的生長素濃度越來越低

C. 干旱對蠶豆葉片中的脫落酸影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對生長素的影響

D. 隨著干旱時間延長,蠶豆葉片內(nèi)的脫落酸濃度越來越大

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】某雌雄異株植物的寬葉和窄葉受圖中Ⅱ-2片段上的一對等位基因F、f控制,顯隱性未知。研究人員用一寬葉雌株與窄葉雄株作親本雜交得到F1,F1中寬葉雌株:窄葉雌株:寬葉雄株:窄葉雄株=1111;卮鹣铝袉栴}:

(1)在該植物的種群中,Ⅱ-1片段是否存在等位基因?___________(填)。

(2)根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷,寬葉和窄葉性狀中顯性性狀是___________,判斷依據(jù)是___________。

(3)研究人員將F1中窄葉雌株和窄葉雄株繼續(xù)雜交,發(fā)現(xiàn)后代總是出現(xiàn)1/4的寬葉。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),寬葉和窄葉還受常染色體上另一對等位基因E、e的影響,據(jù)此推測出現(xiàn)該情況的原因可能是___________。

(4)綜上分析,親本中寬葉雌株與窄葉雄株的基因型分別為___________。

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