(15分)基因敲除是應用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。“基因敲除細胞”構(gòu)建過程如下:

第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細胞(ES),在培養(yǎng)基中擴增。這些細胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。

第二步:構(gòu)建基因表達載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準星”一樣, 將表達載體準確地帶到靶基因的位置。

第三步:將表達載體導入胚胎干細胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細胞的基因改造。

第四步:基因改造后的胚胎干細胞增殖、篩選。

請根據(jù)上述資料,回答下列問題:

(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細胞前,應首先完成                 。

(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細胞通常是             ;若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為             細胞。

(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是             。

(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因             。

 

【答案】

(1)表達載體的構(gòu)建

(2)受精卵   感受態(tài)

(3)作為標志基因,便于篩選

(4)否

【解析】

 

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目:高中生物 來源:2010~2011學年吉林省吉林一中高二下學期第一次月考生物試卷 題型:綜合題

基因敲除是應用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理,用設計好的DNA片段替代動物細胞內(nèi)的基因片段,從而達到基因敲除的目的。在后基因組時代,研究的重點是利用轉(zhuǎn)基因動物或基因敲除的動物研究基因的功能,運用基因重組進行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下圖所示。請回答下列問題:

(1)在把目的基因?qū)胧荏w細胞前,應選擇一個合適的      與之結(jié)合,在這一過程中所需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和             。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則一般是通過病毒感染或顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細胞,選擇的受體細胞應該是                  。
(3)在此類基因操作中,通?梢杂盟傅陌l(fā)光蛋白作為標記物。水母發(fā)光蛋白有發(fā)光環(huán),能在一定條件下發(fā)出熒光,現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是(   )

A.促使目的基因?qū)胧荏w細胞中B.促使目的基因在寄主細胞中復制
C.使目的基因的轉(zhuǎn)移容易被檢測出來D.使目的基因容易表達成功
(4)按上述操作獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠是雜合子,如果想獲得一個目的基因純合的個體,以研究該種動物體內(nèi)靶基因的功能,應該如何進行下一步實驗?                                  
                                                                                 

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科目:高中生物 來源:湖南省長郡中學2009—2010學年下學期高二學業(yè)水平模擬考試(理綜)生物部分 題型:綜合題

(15分)基因敲除是應用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。“基因敲除細胞”構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細胞(ES),在培養(yǎng)基中擴增。這些細胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對,所以能像“準星”一樣,將表達載體準確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達載體導入胚胎干細胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細胞增殖、篩選。
請根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細胞前,應首先完成                。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細胞通常是            ;若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為            細胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是            。
(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因            。

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科目:高中生物 來源:2010~2011學年湖北省高二下學期期中考試生物試卷 題型:綜合題

基因敲除是應用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理,用設計好的DNA片段替代動物細胞內(nèi)的基因片段,從而達到基因敲除的目的。在后基因組時代,研究的重點是利用轉(zhuǎn)基因動物或基因敲除的動物研究基因的功能,運用基因重組進行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下圖所示。請回答下列問題:

(1)在把目的基因?qū)胧荏w細胞前,應選擇一個合適的      與之結(jié)合,在這一過程中所需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和       。

(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則一般是通過病毒感染或顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細胞,選擇的受體細胞應該是         。

(3)在此類基因操作中,通?梢杂盟傅陌l(fā)光蛋白作為標記物。水母發(fā)光蛋白有發(fā)光環(huán),能在一定條件下發(fā)出熒光,現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是(    )

A.促使目的基因?qū)胧荏w細胞中        B.促使目的基因在寄主細胞中復制

C.使目的基因的轉(zhuǎn)移容易被檢測出來    D.使目的基因容易表達成功

(4)按上述操作獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠是雜合子,如果想獲得一個目的基因純合的個體,以研究該種動物體內(nèi)靶基因的功能,應該如何進行下一步實驗?

 

 

 

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科目:高中生物 來源:2010~2011學年吉林省高二下學期第一次月考生物試卷 題型:綜合題

基因敲除是應用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA重組原理,用設計好的DNA片段替代動物細胞內(nèi)的基因片段,從而達到基因敲除的目的。在后基因組時代,研究的重點是利用轉(zhuǎn)基因動物或基因敲除的動物研究基因的功能,運用基因重組進行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下圖所示。請回答下列問題:

(1)在把目的基因?qū)胧荏w細胞前,應選擇一個合適的      與之結(jié)合,在這一過程中所需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和              。

(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則一般是通過病毒感染或顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細胞,選擇的受體細胞應該是                   。

(3)在此類基因操作中,通常可以用水母的發(fā)光蛋白作為標記物。水母發(fā)光蛋白有發(fā)光環(huán),能在一定條件下發(fā)出熒光,現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是(    )

A.促使目的基因?qū)胧荏w細胞中     B.促使目的基因在寄主細胞中復制

C.使目的基因的轉(zhuǎn)移容易被檢測出來 D.使目的基因容易表達成功

(4)按上述操作獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠是雜合子,如果想獲得一個目的基因純合的個體,以研究該種動物體內(nèi)靶基因的功能,應該如何進行下一步實驗?                                  

                                                                                 

 

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