Question

2．中國苦蕎富含黃酮類化合物等營養(yǎng)物質(zhì)，在降血糖、降血脂等方面功效顯著．查爾酮合成酶（CHS）是黃酮類化合物合成的關(guān)鍵酶，如圖為將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系示意圖．

（1）要對培養(yǎng)基徹底滅菌應(yīng)采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，觀察是否形成菌落，目的是判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底．
（2）接種前，外植體用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液進(jìn)行消毒后都需經(jīng)無菌水清洗．接種后2-5天，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是外植體消毒不徹底．
（3）過程②叫做脫分化，通過②和③過程能成功地把離體的苦蕎體細(xì)胞能培育成植株，此技術(shù)所利用的原理是植物細(xì)胞的全能性．
（4）判斷轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，可比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量，也可通過凝膠色譜法分離測定細(xì)胞中CHS含量，由于CHS相對分子量大，所以最先從色譜柱中洗脫出來，工業(yè)化生產(chǎn)中，可利用固定化酶（固定化細(xì)胞）技術(shù)以提高CHS的利用率而節(jié)約成本．

Answer 1

分析 1、實驗室常用的消毒方法
煮沸消毒；化學(xué)藥物消毒；紫外線消毒．
2、實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌；
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min．
3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)包括脫分化和再分化兩個重要過程，而決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要．

解答 解：（1）要對培養(yǎng)基徹底滅菌應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌．為了判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，接種前，用滅菌后未接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，觀察是否形成菌落．
（2）接種前，外植體用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液進(jìn)行消毒后都需經(jīng)無菌水清洗．接種后2-5天，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是外植體消毒不徹底．
（3）過程②叫做脫分化，過程③表示再分化，通過脫分化和再分化過程能成功地把離體的苦蕎體細(xì)胞能培育成植株，此技術(shù)所利用的原理是植物細(xì)胞的全能性．
（4）判斷轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，可比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量，也可通過凝膠色譜法分離測定細(xì)胞中CHS含量，由于CHS相對分子量大，所以最先從色譜柱中洗脫出來，工業(yè)化生產(chǎn)中，可利用固定化酶（固定化細(xì)胞）技術(shù)以提高CHS的利用率而節(jié)約成本．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌   判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底
（2）70% 的酒精   外植體消毒不徹底
（3）脫分化    植物細(xì)胞的全能性
（4）相對分子量大    固定化酶（固定化細(xì)胞）

點評 本題綜合考查了微生物的分離與培養(yǎng)和植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力．