【題目】有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會(huì)污染環(huán)境,研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解,分離能降解苯磺隆菌株的實(shí)驗(yàn)過程如下圖所示。請(qǐng)回答問題:

(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、________________四類,該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是_________________________________。

(2)純化菌株時(shí),通常使用的劃線工具是________。在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是____________________________________________________。

(3)若要檢測土樣中的細(xì)菌含量,應(yīng)采用__________法。在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是____________________________________。

然后,將1 mL土壤溶液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接入0.1 mL稀釋液,經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為________個(gè)。

【答案】1)氮源 無機(jī)鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖

2)接種環(huán) 將聚集的菌體逐步減少以便獲得單個(gè)菌落

3)稀釋涂布平板 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107

【解析】試題分析:微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等.篩選目的微生物必須使用選擇培養(yǎng)基.從土壤中分離微生物的一般步驟是:土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株常用的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法.

解:(1)微生物生長所需要的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括:碳源、氮源、水和無機(jī)鹽.使用選擇培養(yǎng)基是因?yàn)檫x擇培養(yǎng)基只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖,同時(shí)又能抑制或阻止其他微生物的生長的培養(yǎng)基.(2)平板劃線法接種時(shí)常使用接種環(huán)劃線.在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開始劃線.這樣做的目的是將聚集的菌體逐步減少以便獲得單個(gè)菌落.

3)興奮題表平板法常常用來進(jìn)行微生物的分離和計(jì)數(shù).為檢驗(yàn)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,常常需要在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,觀察有無菌落形成,若沒有菌落形成則表明培養(yǎng)基滅菌合格,否則則不合格.根據(jù)題意,每升土壤溶液中的活菌數(shù)為:(39+38+37÷3×100÷0.1×1000=3.8×107個(gè).

故答案為:

1)氮源 無機(jī)鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長和繁殖

2)接種環(huán) 將聚集的菌體逐步減少以便獲得單個(gè)菌落

3)稀釋涂布平板 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107

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