【題目】蘋果園廣泛使用的一種除草劑(含氮有機物)在土壤中不易被降解,長期使用可污染土壤。

(1)制備土壤浸出液時,為避免菌體濃度過高,需將浸出液進行稀釋處理,F(xiàn)有一升土壤浸出液,用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有9mL無菌水的試管中,依次稀釋103倍。各取0.1mL已稀釋10 3倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng),記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57,則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為______。

(2)科學工作者為修復被該除草劑污染土壤的目的來選擇細菌,所用培養(yǎng)基應該______。

(3)接種技術的核心是______。在劃線接種時,連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步______,培養(yǎng)時,只有很少菌落出現(xiàn),大部分細菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是______或有氧條件抑制了這些細菌的生長。

(4)在培養(yǎng)基上形成的菌落中,無透明帶菌落利用的氮源主要是______,有透明帶菌落利用的氮源主要是______,據(jù)此可篩選出目的菌。實驗結果如圖乙顯示的A~E五種菌株中,______是最理想菌株。

【答案】5.6x109在無氮培養(yǎng)基添加了該除草劑防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度稀釋獲得單個菌落培養(yǎng)基中缺少這些細菌可利用的氮源氮氣該除草劑E

【解析】試題分析:培養(yǎng)基中加入某種化學物質,以抑制不需要的不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物生長,本題這種根據(jù)流程圖看,“無氮培養(yǎng)基+高濃度的除草劑”,說明A、B、C培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源。

(1)圖中稀釋的倍數(shù)是108,三個菌落的平均數(shù)=(55+56+57)÷3=56,則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷1×108=5.6×109個,所以每升土壤浸出液中的菌株數(shù)=5.6×109×103=5.6×1012個。(2)該除草劑為含氮有機物,為了選育能降解該除草劑的細菌,應采用唯一氮源的選擇培養(yǎng)基,即無氮的固體培養(yǎng)基中添加該除草劑。(3)接種技術的核心是無菌操作,防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度,在劃線接種時,連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落,培養(yǎng)時,只有很少菌落出現(xiàn),大部分細菌在此培養(yǎng)基上不能生長,原因是培養(yǎng)基缺少這些細菌可利用的氮源。(4)由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明,被菌落分解后可產生透明帶,無透明帶說明除草劑未被分解,菌落利用的氮源就只能是空氣中的氮氣了;而出現(xiàn)透明帶說明除草劑被分解,菌落是分解該除草劑的細菌,氮源是該除草劑;E透明圈最大,故是最理想菌株。

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