Question

3．研究發(fā)現(xiàn)，將心肌細(xì)胞直接移植到心臟受損部位能夠改善心臟功能，這是一種治療缺血性心臟病的有效方法．胚胎干細(xì)胞（ESC）在體外能被誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞，但刷時(shí)會產(chǎn)生大量非心肌細(xì)胞．科研人員利用基因工程技術(shù)，使增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）基因在心肌細(xì)胞特異性表達(dá)，以利于從ESC分化產(chǎn)生的細(xì)胞中篩選出心肌細(xì)胞．該基因工程技術(shù)基本流程如圖．請結(jié)合上述材料同答下列問題．

（1）過程①中，利用限制酶MluⅠ、NheⅠ處理以獲得α-MHC啟動(dòng)子．
（2）過程②的目的是使EGFP基因在心肌細(xì)胞中特異性表達(dá)．
（3）將表達(dá)載體2導(dǎo)入ESC中，常利用顯微注射技術(shù)．
（4）進(jìn)行過程④后，若檢測到發(fā)出綠色熒光細(xì)胞，則該細(xì)胞為心肌細(xì)胞．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：①過程表示獲取目的基因，②過程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示從囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞，④表示細(xì)胞的增殖分化．

解答 解：（1）過程①中，利用限制酶MluⅠ、NheⅠ處理以獲得α-MHC啟動(dòng)子，使得α-MHC基因在心肌細(xì)胞中能轉(zhuǎn)錄．
（2）過程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，目的是使EGFP基因在胚胎干細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并在心肌細(xì)胞中特異性表達(dá)．
（3）過程③中，從囊胚分離出內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，具有發(fā)育的全能性，屬于胚胎干細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)可獲得ESC．因此，將表達(dá)載體2導(dǎo)入ESC中，常利用顯微注射技術(shù)．
（4）進(jìn)行過程④后，若檢測到發(fā)出綠色熒光細(xì)胞，則該細(xì)胞為心肌細(xì)胞．
故答案為：
（1）α-MHC啟動(dòng)子
（2）EGFP  心肌
（3）顯微注射
（4）發(fā)出綠色熒光

點(diǎn)評 本題考查基因工程、胚胎干細(xì)胞等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識圖和分析能力，難度不大．