ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                       。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                        酶

對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是         ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用            制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

（10分）ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。
第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：
（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？        。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                  。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                      。
（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                       酶
對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的             鍵打開(kāi)。
（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是        ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用           制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入             可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？           。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，其作用是                                         。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                                          。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                                  酶對(duì)基 因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的               鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是                      ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用                   制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。

（10分）ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下：

第①步：用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。

第③步：將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質(zhì)粒2。

第④步：將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同，所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組，產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料，回答下列問(wèn)題：

（1）第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物，引物的實(shí)質(zhì)是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟，其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照？                       。

（3）構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí)，為保證成功率，往往使用                        酶

對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開(kāi)。

（4）質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，其化學(xué)本質(zhì)是         ，此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。

（5）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選，可用            制成探針，檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。