30.     （18分）

科學(xué)工作者利用基因工程研制出兩種丙肝病毒疫苗，為檢測兩種疫苗的免疫效果，以小鼠為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如下表：

組別	實(shí)驗(yàn)處理	淋巴細(xì)胞 增殖	產(chǎn)生某種 淋巴因子	效應(yīng)T細(xì)胞 殺傷力	產(chǎn)生特異性抗體
1	接種生理鹽水	－	－	－	－
2	接種未重組空白載體	＋	＋	＋	－
3	接種重組DNA疫苗	＋＋	＋＋	＋＋	＋
4	接種未重組細(xì)菌	＋	＋	＋	－
5	接種重組細(xì)菌疫苗	＋＋	＋＋＋	＋＋＋	＋＋

注：“－”表示免疫應(yīng)答效果不顯著，“＋”數(shù)目表示免疫應(yīng)答效果的顯著程度。

⑴ 制備疫苗的過程中首先要形成重組DNA分子，其過程是以分枝桿菌的________作為載體，目的基因來源于________（生物），用________限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，用________酶進(jìn)行連接。再將該重組DNA分子直接導(dǎo)入分枝桿菌，可制成重組細(xì)菌疫苗�；蛘邔υ撝亟MDNA分子進(jìn)行修飾使其能在真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可制成DNA疫苗。

⑵ 重組細(xì)菌進(jìn)入小鼠的巨噬細(xì)胞內(nèi)，利用________細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)合成抗原蛋白。

⑶ 設(shè)置第2組和第4組作為對照，其目的是________。檢測結(jié)果顯示，未重組細(xì)菌和未重組空白載體________（能/不能）刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫。

⑷ 每組實(shí)驗(yàn)需要接種3次，利用再次免疫具有________的特點(diǎn)，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加顯著。效應(yīng)T細(xì)胞可來源于________。

⑸ 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

   ①___________________________________________________；

   ②___________________________________________________。

白細(xì)胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細(xì)胞介素的基因?qū)�入酵母�?xì)胞中,使其分泌出有活性的人白細(xì)胞介素。

   

    (1)在體液免疫過程中,白細(xì)胞介素是由　　　　細(xì)胞分泌的,可作用于受到抗原刺激的B細(xì)胞,使B細(xì)胞增殖、分化,形成　　　　細(xì)胞。 

    (2)目的基因獲取:從健康人體外周靜脈血分離得到淋巴細(xì)胞,于37 ℃培養(yǎng)48 h后提取細(xì)胞總RNA,生成cDNA。根據(jù)已知目的基因的核苷酸序列合成引物,通過PCR擴(kuò)增獲取目的基因,此時(shí)需要加入的反應(yīng)物與生成cDNA時(shí)所加反應(yīng)物不同的是 

    (3)重組載體的構(gòu)建:用兩種限制酶EcoR 1和EcoR 52處理載體和目的基因后用　　　　　酶處理,形成重組載體。該載體與細(xì)胞膜載體的化學(xué)本質(zhì)分別是　　　　和　　　　。 

   

   

30.     （18分）

科學(xué)工作者利用基因工程研制出兩種丙肝病毒疫苗，為檢測兩種疫苗的免疫效果，以小鼠為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如下表：

組別	實(shí)驗(yàn)處理	淋巴細(xì)胞 增殖	產(chǎn)生某種 淋巴因子	效應(yīng)T細(xì)胞 殺傷力	產(chǎn)生特異性抗體
1	接種生理鹽水	－	－	－	－
2	接種未重組空白載體	＋	＋	＋	－
3	接種重組DNA疫苗	＋＋	＋＋	＋＋	＋
4	接種未重組細(xì)菌	＋	＋	＋	－
5	接種重組細(xì)菌疫苗	＋＋	＋＋＋	＋＋＋	＋＋

注：“－”表示免疫應(yīng)答效果不顯著，“＋”數(shù)目表示免疫應(yīng)答效果的顯著程度。

⑴ 制備疫苗的過程中首先要形成重組DNA分子，其過程是以分枝桿菌的________作為載體，目的基因來源于________（生物），用________限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體，形成相同的粘性末端，用________酶進(jìn)行連接。再將該重組DNA分子直接導(dǎo)入分枝桿菌，可制成重組細(xì)菌疫苗�；蛘邔υ撝亟MDNA分子進(jìn)行修飾使其能在真核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，可制成DNA疫苗。

⑵ 重組細(xì)菌進(jìn)入小鼠的巨噬細(xì)胞內(nèi)，利用________細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)合成抗原蛋白。

⑶ 設(shè)置第2組和第4組作為對照，其目的是________。檢測結(jié)果顯示，未重組細(xì)菌和未重組空白載體________（能/不能）刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫。

⑷ 每組實(shí)驗(yàn)需要接種3次，利用再次免疫具有________的特點(diǎn)，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加顯著。效應(yīng)T細(xì)胞可來源于________。

⑸ 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

   ①___________________________________________________；

   ②___________________________________________________。

某同學(xué)為驗(yàn)證“體液免疫需要T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的共同參與”，利用給定的材料設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)材料：未受感染的體重相同的小白鼠若干只,X射線照射儀，新鮮的T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，毒性極低的霍亂弧菌疫苗以及其他必要的工具。

實(shí)驗(yàn)原理：T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的有無，能影響抗體的產(chǎn)生，通過測定血清中抗體數(shù)量的多少可判斷體液免疫的強(qiáng)弱。

方法步驟：

第一步：將小白鼠分為1、2、3三組，分別摘除胸腺，并用大量的X射線照射。

第二步：向第1組小鼠體內(nèi)注射T淋巴細(xì)胞，向第2組小鼠體內(nèi)注射B淋巴細(xì)胞，向第3組小鼠體內(nèi)注射T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。

第三步：分別在上述三組小鼠體內(nèi)接種霍亂弧菌疫苗。

第四步：飼養(yǎng)一段時(shí)間后，分別測定各組小鼠體內(nèi)血清中抗體的數(shù)量。

請回答下列問題：

（1）上述實(shí)驗(yàn)步驟中存在不嚴(yán)謹(jǐn)之處，請指出并更正。

(2)結(jié)果預(yù)期及結(jié)論：

（13分）請根據(jù)所學(xué)知識(shí)，回答下列與生命活動(dòng)調(diào)節(jié)相關(guān)的問題：

Ⅰ．（1）人體進(jìn)行正常生命活動(dòng)的必要條件是                     。

（2）性激素與甲狀腺激素的分泌調(diào)節(jié)方式相似，由此推測下丘腦通過分泌                 激素間接調(diào)節(jié)性腺的活動(dòng)。

（3）已知卵巢分泌的雌性激素能促進(jìn)子宮發(fā)育。研究人員為探究激素影響卵巢和子宮的發(fā)育，用一批幼鼠做了如下實(shí)驗(yàn)：請回答：

① 分組時(shí)應(yīng)將______________雌幼鼠隨機(jī)分成______組，每組10只。

② 表中第2組A的處理方法是              。

③ 第3組實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因是                                           。

Ⅱ．下圖甲是a-銀環(huán)蛇毒引發(fā)機(jī)體免疫效應(yīng)的部分示意圖，圖乙是a-銀環(huán)蛇毒影響興奮傳遞的部分示意圖。請分析回答：

（1）當(dāng)興奮傳導(dǎo)到圖乙⑥處時(shí)，其膜內(nèi)的電位是_________。由圖乙可知，a-銀環(huán)蛇毒影響興奮傳遞的原因是_________________________________________________。

（2）請寫出a-銀環(huán)蛇毒侵入人體引發(fā)體液免疫被清除的過程。