Question

10．科學家發(fā)現家蠅體內存在一種抗腫瘤蛋白（且具有抗菌能力），受到研究者重視．臨床使用發(fā)現此蛋白質對腫瘤確實有良好的療效，可以通過基因工程技術導入大腸桿菌內進行大量生產．其過程大體如圖1所示：

（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有鳥槍法、人工合成法、PCR（至少寫出兩種）．
（2）圖中a過程叫構建基因表達載體，它是基因操作的核心步驟，該過程中切質粒和目的基因的限制酶可以不同，但是產生的粘性末端要滿足嚴格互補條件．
（3）將抗腫瘤基因導入大腸桿菌，并在大腸桿菌細胞內成功表達產生了抗腫瘤蛋白，由于大腸桿菌具有繁殖快、代謝速度快特點，因此在短時間內就能獲得大量的抗腫瘤蛋白．
（4）細胞工程可以作為輔助手段，通過獲得特定的單克隆抗體并與抗腫瘤蛋白結合制成“生物導彈”，以實現“靶向殺癌”．如圖2所示是單克隆抗體制備過程示意圖，請據圖回答：
①圖中A過程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細胞”是B細胞，要獲得能產生抗腫瘤蛋白抗體的雜交瘤細胞至少要經過二次篩選．從小鼠體內提取分離該細胞之前，給小鼠注射的特定的物質是特異性的抗原．
②為檢測雜交瘤細胞是否成功的合成了單克隆抗體，可以采用抗原抗體雜交的方法．

Answer 1

分析 分析圖解：
圖1，圖中a表示構建的基因載體，然后將目的基因導入大腸桿菌．
圖2表示單克隆抗體制備的過程，圖中A表示從小鼠的脾臟中獲得已免疫的B淋巴細胞，B表示動物細胞融合．

解答 解：（1）在基因工程中，獲取目的基因的方法有鳥槍法、人工合成法、PCR．
（2）圖中a過程叫構建基因表達載體，它是基因操作的核心步驟，該過程中切質粒和目的基因的限制酶可以不同，但是兩者產生的粘性末端必須能夠堿基互補配對．
（3）大腸桿菌具有繁殖快、代謝速度快特點，因此將抗腫瘤基因導入大腸桿菌，并在大腸桿菌細胞內成功表達產生了抗腫瘤蛋白，可以在短時間內就能獲得大量的抗腫瘤蛋白．
（4）①單克隆抗體的制備過程中，采用的是已免疫的小鼠B細胞（漿細胞或效應B細胞），即經過注射特異性抗原，然后和骨髓瘤細胞的融合，需要經過至少兩次篩選（第一次篩選獲得雜交瘤細胞，第二次篩選獲得能產生抗體的雜交瘤細胞），最終篩選出來的雜交瘤細胞．
②為檢測雜交瘤細胞是否成功的合成了單克隆抗體，可以采用抗原抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）鳥槍法、人工合成法、PCR
（2）構建基因表達載體 嚴格互補
（3）繁殖快 代謝速度快
（4）B 二  特異性的抗原 抗原抗體雜交

點評 本題結合圖解，考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細節(jié)；識記單克隆抗體的制備過程，能結合圖解準確答題．