【題目】下圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn),ampR為青霉素抗性基因,tetR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動(dòng)子,T為終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。

據(jù)圖回答:

1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRI酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后,其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有 、 三種。若 要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒,需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行 。

2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 ;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 。

3)目的基因表達(dá)時(shí),RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是 ,其合成的產(chǎn)物是

4)在上述實(shí)驗(yàn)中,為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是 。

【答案】1)目的基因載體連接物 載體載體連接物 目的基因目的基因連接物 分離純化

2)載體載體連接物 目的基因載體連接物、載體載體連接物

3)啟動(dòng)子 mRNA

4EcoRIBamHI

【解析】1)用EcoRI酶切出的目的基因和質(zhì)粒具有相同的黏性末端,如果放在一起加入DNA連接酶,則可出現(xiàn)三種連接結(jié)果,即會(huì)出現(xiàn)目的基因自身形成的連接物,載體自身形成的連接物和重組質(zhì)粒,要通過篩選、純化才能選出符合要求的DNA。(2)載體自身形成的連接物能重新形成完整的tetR基因,具有抗四環(huán)素的特點(diǎn),其他連接物中tetR基因被限制性內(nèi)切酶破壞,不再具有抗四環(huán)素的特點(diǎn);在整個(gè)操作過程中,ampR基因保持完整,質(zhì)粒自身形成的連接物和重組質(zhì)粒都具有抗青霉素的特性。(3RNA聚合酶與相關(guān)基因的啟動(dòng)子結(jié)合,完成的是轉(zhuǎn)錄過程。(4)將含有目的基因的靶DNA片段和載體分別用兩個(gè)不同的限制性內(nèi)切酶切割,使兩種DNA片段自身的5′3′黏性末端不同,但二者相同末端又互補(bǔ),這明顯減少靶DNA片段和載體自身環(huán)化與串連,使外源DNA片段能正確插入載體啟動(dòng)子下游。在本題中目的基因兩端有EcoRI酶切點(diǎn)和BamHI酶切點(diǎn),在質(zhì)粒載體上也有這兩種酶的切點(diǎn),所以可以用這兩種酶切出非同源性互補(bǔ)末端來阻止其他連接。

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B某種可水解肽鏈末端肽鍵的肽酶最終導(dǎo)致多肽鏈分解為若干短肽

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A. c、e、f

B. a、e、b

C. a、b、d

D. c、d、f

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(1)實(shí)現(xiàn)圖中的①過程最常用的方法是________。

(2)②過程的發(fā)生,必須進(jìn)行____________,其方法有____________法和____________法。

(3) 若細(xì)胞A內(nèi)含a個(gè)染色體,細(xì)胞B內(nèi)含b個(gè)染色體,則“雜種細(xì)胞”內(nèi)含________個(gè)染色體;若A、B植株采用常規(guī)雜交育種方法成功的話,得到的后代含_____個(gè)染色體,必須用______________來處理幼苗,才能得到可育的雜種植株,其中含有_____個(gè)染色體。這兩種方法相比,體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是:__________________________________。

(4)如果原生質(zhì)體A為小鼠的漿細(xì)胞,原生質(zhì)體B為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)二者融合時(shí),獨(dú)特的方法是用_______處理。

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【題目】關(guān)于光合作用和呼吸作用的敘述,錯(cuò)誤的是(
A.磷酸是光反應(yīng)中合成ATP所需的反應(yīng)物
B.光合作用中葉綠素吸收光能不需要酶的參與
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B.含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上
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D.含四大營(yíng)養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上

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A.
B.
C.
D.

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B. 圖中③過程產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植株是基因突變的結(jié)果

C. 圖中④過程“航天育種”方法中發(fā)生的變異類型是染色體畸變

D. 圖中單倍體加倍成純合矮桿抗病植株的方法常用秋水仙素處理幼苗或萌發(fā)的種子

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