Question

4．苦蕎是一種有名的經(jīng)濟植物，其含有的黃酮類化合物（分子量為254）具有降血糖、血脂等功效．CHS是合成黃酮類化合物的關鍵酶．有人把經(jīng)修飾的CHS基因（使CHS表達增強）導入苦蕎細胞中，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系．按圖示回答：

（1）過程①中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒的酶稱為DNA連接酶．這種酶主要有兩類，一類是從T₄噬菌體中分離得到的，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E．coliDNA連接酶．這兩類酶都能連接互補的DNA黏性末端的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（2）圖中將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎體細胞的方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此外還可以利用的方法有基因槍法、花粉管通道法．對過程②操作前，需先用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌，使其成為感受態(tài)細胞．
（3）檢測轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原--抗體雜交技術進行檢測的原因是轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有CHS，可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量或測定細胞中CHS含量進行鑒定．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是把經(jīng)修飾的CHS基因?qū)�入苦蕎細胞中，培育高產(chǎn)黃酮苦蕎品系的過程，其中①表示基因表達載體的構建過程，②表示將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌細胞的過程，③表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入受體細胞的過程．

解答 解：（1）過程①中將修飾后的CHS基因與Ti質(zhì)粒連接成重組Ti質(zhì)粒需要DNA連接酶．這種酶主要有兩類，一類是從T4噬菌體中分離得到的，稱為T4DNA連接酶，另一類是從大腸桿菌中分離得到的，稱為E．coliDNA連接酶．DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（2）將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法、基因槍法，圖中將修飾后的CHS基因?qū)�入苦蕎體細胞采用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．將目的基因?qū)�入微生物細胞需要采用感受態(tài)細胞法，即需先用Ca²⁺處理農(nóng)桿菌，使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞．
（3）檢測轉(zhuǎn)基因苦蕎培育是否成功，不能用抗原--抗體雜交技術進行檢測，原因是轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有黃酮類化合物，可以比較轉(zhuǎn)基因苦蕎與普通苦蕎的黃酮類化合物含量或測定細胞中CHS含量進行鑒定．
故答案為：
（1）DNA連接酶     E．coliDNA連接酶   DNA黏性     磷酸二酯
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法    基因槍法、花粉管通道法   感受態(tài)
（3）轉(zhuǎn)基因苦蕎植株與普通苦蕎植株都含有CHS     黃酮類化合物

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟及相關細節(jié)，掌握基因工程技術的相關應用，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．