Question

【題目】已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

（1）實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過程是________________。

（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用限制性酶和________________酶，后者的作用是將用限制酶切割的________________和_______________連接起來。

（3）如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能_______________，也不能_________________________。

（4）為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用_________________________與_____________________ 的血清進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論。

（5）步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列_______（相同，不同），根本原因是______

Answer 1

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄 DNA連接 載體 S基因 復(fù)制 合成S基因的mRNA 大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白 SARS康復(fù)病人 相同 表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同

【解析】試題分析：本題主要考查基因工程。要求學(xué)生熟知目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建方法、目的基因的檢測與鑒定方法。

（1）據(jù)圖可知，過程①是以RNA為模板合成DNA的過程，即是逆轉(zhuǎn)錄。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建需要使用限制酶和DNA連接酶；DNA連接酶的作用是將目的基因（S基因）和運(yùn)載體連接在一起。

（3）若把S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，S基因很難把自己整合到細(xì)菌的DNA上，這樣的S基因是無法復(fù)制和轉(zhuǎn)錄（合成S基因的mRNA）的；

（4）要想檢驗(yàn)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同作用，必須要獲得病毒S蛋白，根據(jù)免疫知識(shí)，SARS康復(fù)病人血清應(yīng)該含有該物質(zhì)。檢測蛋白質(zhì)的方法是抗原—抗體雜交，即將大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白與SARS康復(fù)病人血清（含有抗S蛋白的抗體）結(jié)合。

（5）由于基因相同，因此所表達(dá)的蛋白質(zhì)中氨基酸序列也應(yīng)相同。