Question

10．【加試題】生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）培養(yǎng)大腸桿菌所用的LB培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌．檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)?br />（2）將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀涂布到LB固體培養(yǎng)基，倒置于恒溫培養(yǎng)箱，在37℃條件進(jìn)行培養(yǎng)．用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要（填需要或不需要）設(shè)置對(duì)照組．
（3）如圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是C．

A．步驟①倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)立即將其倒過(guò)來(lái)放置
B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線
C．步驟③多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋?zhuān)�培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落
D．步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來(lái)對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)．

Answer 1

分析 1、稀釋涂布法：是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)．在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落．能夠測(cè)定樣品中活菌數(shù)的方法是：稀釋涂布平板法．
2、由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培養(yǎng)．

解答 解：（1）培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌．檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)?br />（2）將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀涂布到LB固體培養(yǎng)基，為了防止冷凝水污染培養(yǎng)基，因此需要將培養(yǎng)基 倒置于恒溫培養(yǎng)箱，在37℃條件進(jìn)行培養(yǎng)．用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置空白對(duì)照組．
（3）A、倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過(guò)來(lái)放置，A錯(cuò)誤；
B、步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以沾取菌液后平板劃線，B錯(cuò)誤；
C、步驟③多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋?zhuān)�培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落，C正確；
D、步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來(lái)對(duì)大腸桿菌進(jìn)行分離得到純種，平板劃線法不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌    無(wú)菌水
（2）涂布    倒置     37      需要         
（3）C

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容，掌握稀釋涂布平板法和平板劃線法的操作步驟以及應(yīng)用區(qū)別，明確只有稀釋涂布平板法能夠?qū)ξ⑸�物進(jìn)行計(jì)數(shù)．