Question

18．牛奶是微生物生長的良好培養(yǎng)基．生鮮牛奶中的微生物情況反映了奶牛的健康狀況，也影響奶制品的運輸和貯藏．牛奶在飲用前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物．為檢測消毒前后牛奶中細菌含量變化情況，做如圖1所示操作．用無菌吸管從錐形瓶中吸取1mL生牛奶稀釋液至盛有9mL無菌水的試管中，混合均勻，如此再重復2次．請回答下列有關問題：

（1）利用巴氏消毒法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）取最終的牛奶稀釋液0.1mL滴在培養(yǎng)基上進行涂布，應選擇的涂布工具是下圖2中的B．
（3）圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落．若用該方法培養(yǎng)設置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個、33個、34個，則可以推測生牛奶中每毫升含細菌數(shù)為3.4×10⁶個．運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值偏�。ㄌ睢捌�大”或“偏小”），原因是個別菌落可能是由2個或多個細菌形成．
（4）消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數(shù)量，則在操作步驟上應做什么改動？稀釋次數(shù)減少．
（5）從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測出大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認定為大腸桿菌．

Answer 1

分析 圖1為稀釋涂布平板法，圖2中A為接種環(huán)，B為涂布器，C為滴管，D為接種針．
滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等．消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等．稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）將液體菌種接種在固體培養(yǎng)基上常用的方法主要是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器．即圖2中的B．
（3）由于圖中稀釋了10⁴倍，牛奶中每毫升含細菌數(shù)為（35+33+34）÷3÷0.1×10⁴=3.4×10⁶個．由于經(jīng)此方法接種培養(yǎng)時當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，所以運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值偏�。�
原因是 個別菌落可能是由2個或多個細菌形成．
（4）消毒后的牛奶中絕大部分細菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細菌的數(shù)量，由于細菌數(shù)目減少，故應稀釋次數(shù)減少．
（5）檢測大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加人伊紅美藍，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認定為大腸桿菌．
故答案為：
（1）牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞
（2）B
（3）3.4×10⁶ 偏小 個別菌落可能是由2個或多個細菌形成
（4）稀釋次數(shù)減少
（5）伊紅美藍 （金屬光澤的紫）黑色

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)的相關知識，關鍵是要求學生弄清滅菌與消毒的概念、方法、適用對象和微生物的接種與計數(shù)．